抗原提示細胞におけるHIVの増殖抑制とウイルスの細胞指向性について

抑制抗原呈递细胞中的 HIV 增殖和病毒的细胞向性

• 批准号: 08269228
• 负责人: 横田 恭子
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: 国立予防衛生研究所
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08269228/
• 关键词: HIV-LTR; 抗原特異的T細胞活性化; DNA結合蛋白; プロモーター活性; ウイルス増殖

末梢血由来の単球をIL-4とGM-CSFの存在下に分化誘導した樹状細胞(DC)は抗原特異的にT細胞を活性化すると同時にウイルスを伝播し、T細胞による大量のウイルス産生を誘導する。抗原により初期に活性化されたIL-2を産生するのはCD45RO陽性の記憶T細胞であるが、培養中にCD45RA陽性ナイーブT細胞も活性化され、ウイルス産生は両T細胞亜集団において同程度に誘導される。この様な抗原特異的T細胞活性化においてウイルス産生を制御するシグナルについて解析するためウイルスのLTRに欠失を導入し、それらのプロモーター活性およびウイルス増殖への影響について検討した。LTRに2箇所存在するNF-kBあるいは3箇所存在するSP-1部位が欠失したLTRにそれぞれルシフェラーゼ遺伝子を導入し、CEM細胞株におけるプロモーター活性を測定したところ、これらの欠失によりtat存在下でのプロモーター活性はwild typeの20-30%程度に低下した。更に両方とも欠失したLTRはtat存在下でも非存在下と同様極く低いプロモーター活性しか示さなかった。これらのLTRを有する組み替えウイルスクローンは初期感染性においてほぼ同一であるのにもかかわらず、CEM細胞株ではどれも増殖しなかった。一方DCにより抗原特異的に活性化されるCD45RO陽性T細胞では、SP-1欠失ウイルスはwild typeと比較して増殖は遅延したが、2週間後のウイルス産生量はほぼ同レベルであった。NF-kB欠失ウイルスの増殖はドナーによってより顕著に低下する例と、wild typeと全く変わらない例とあり、生体内でのT細胞の活性化の状況によってウイルス増殖におけるNF-kBの依存性に個体差が生じている可能性が示唆された。実際にLTRに結合する蛋白がCEMのそれとどのような相違があるのか更に解析する必要がある。

Peripheral blood origin の 単 ball を IL - 4 と gm-csf の に induced differentiation in the presence of し た dendritic cells (DC) は antigen specific T cells を に activeness す る と simultaneously に ウ イ ル ス を 伝 し feeding, T cells に よ る large の ウ イ ル ス produce を induced す る. Early antigen に よ り に activeness さ れ た IL - 2 を produce す る の は CD45RO positive の memory T cells で あ る が, cultivation of に CD45RA positive ナ イ ー ブ t-cell も activeness さ れ, ウ イ ル ス produce は struck T cells 亜 set 団 に お い て に induced the same extent さ れ る. こ の others な antigen specific T cells activation に お い て ウ イ ル ス produce を suppression す る シ グ ナ ル に つ い て parsing す る た め ウ イ ル ス の LTR に owe lost を import し, そ れ ら の プ ロ モ ー タ ー active お よ び ウ イ ル ス raised colonization へ の influence に つ い て beg し 検 た. LTR に two existing す る NF - kB あ る い は three existing す る が owe SP 1 parts lost し た LTR に そ れ ぞ れ ル シ フ ェ ラ ー ゼ heritage 伝 を import し, CEM cell line に お け る プ ロ モ ー タ ー determination of active を し た と こ ろ, こ れ ら の owe lost に よ り tat in the presence of で の プ ロ モ ー タ ー active は wild type <s:1> 20-30% degree に low た た. Lost more に struck party と も owe し た LTR は tat in the presence of で も non と with others in the presence of very low く い プ ロ モ ー タ ー active し か shown さ な か っ た. こ れ ら の LTR を have す み る group for え ウ イ ル ス ク ロ ー ン は early infective に お い て ほ ぼ same で あ る の に も か か わ ら ず, CEM cell line で は ど れ も raised colonization し な か っ た. A DC に よ り antigen specific に activeness さ れ る CD45RO positive T cells で は owe loss, SP - 1 ウ イ ル ス は wild type と compare し て raised colonization は 遅 delay し た が, 2 weeks after の ウ イ ル discharge ス は ほ ぼ with レ ベ ル で あ っ た. NF - kB owe lost ウ イ ル ス の raised colonization は ド ナ ー に よ っ て よ り 顕 with low に す る と, wild type と く all variations わ ら な い example と あ り, born in vivo で の T cells の activeness の condition に よ っ て ウ イ ル ス raised colonization に お け る NF - kB の dependency に individuals born poor が じ て い が る possibility in stopping さ れ た. Be interstate に LTR に combining す る protein が CEM の そ れ と ど の よ う な conceives が あ る の か more analytical す に る necessary が あ る.

项目成果

S.Hagiwara,Y.Tsunetsugu-Yokota,et al.: "Expression of Vpre-B3 (8HS-20) molecules by alternative RNA processing." International Immunology. 8. 101-108 (1996)

S.Hagiwara、Y.Tsunetsugu-Yokota 等人：“通过替代 RNA 加工表达 Vpre-B3 (8HS-20) 分子。”

Y.Misawa,et al.: "CD43 expression in a B-cell lymphoma,WEHI231,reduced susceptibility to G1 arrest and extended the survival in culture upon serum depletion." European J.of Immunology. 26. 2573-2581 (1996)

Y.Misawa 等人：“B 细胞淋巴瘤 WEHI231 中的 CD43 表达降低了 G1 期停滞的易感性，并延长了血清耗竭后培养物的存活时间。”