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哺乳動物精子アクロソームタンパク質の選択的分解機構と生理機能獲得に関する研究

哺乳动物精子顶体蛋白选择性降解机制及生理功能获得研究

基本信息

批准号：
08278201
负责人：
馬場忠
金额：
$ 1.28万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

まず、すでに作製しているアクロシン欠損マウスの精巣上体精子について検討したところ、野生種のものよりも卵透明帯への精子の侵入・通過に有意な遅延が認められた。また、アクロシン以外の新規セリン系プロテ-ゼが精子に存在することも見い出された。この新規セリンプロテアーゼ遺伝子の同定とクローンの単離を試み、その候補者としてカッパインをコードするcDNAと染色体遺伝子クローンを単離・解析した。マウスカッパインは前駆体プロテアーゼとして合成され、36残基の軽鎖と300残基の重鎖がひとつのジスルフィド結合により連結されているような成熟型酵素にプロセシングされることが明らかとなった。マウスカッパイン遺伝子は、全長約5キロ塩基対で5個のエクソンより構成されており、マウス染色体上でシングルコピーとして存在することも明らかとなった。また、カッパイン遺伝子は精巣特異的に発現しており、精子形成過程ではほかのアクロソームタンパク質遺伝子と同様にパキテン期精母細胞ですでに転写が開始しており、半数体精細胞でその発現が最も盛んであった。組織化学的な観察より、カッパインはアクロソーム下部、あるいはアクロソームと接する赤道部上端に沿った限定された部位に局在していることが判明した。このカッパインの生体内機能解析のために、ターゲティングベクターを構築してES細胞経由で遺伝子相同組換えを試み、目的のES細胞クローンを単離した。現在、カッパイン遺伝子に変異を生じているキメラマウスより、カッパインを完全に欠損する変異マウスを作製中である。

In the wild, the sperm of the sperm. The new rules for sperm production are: The new regulation provides for the identification and analysis of cDNA and chromosomal DNA sequences in the genome. The enzyme precursor is linked to the 36-residue chain and the 300-residue chain is linked to the mature enzyme. It is composed of five chromosomes, each with a total length of about 5 cm. Spermatogenesis begins with the development of sperm cells, and sperm cells are most abundant in the development of sperm cells. Histochemical examination of the lower part of the equator, along the upper part of the equator In vivo function analysis of ES cells, the construction of ES cells, the identification of ES cells, and the identification of ES cells. Now, if you want to make a difference, you have to make a difference.