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精子細胞膜マイクロドメインの解析による精子と卵の相互作用に関する新しい理論構築

通过分析精子细胞膜微区构建精卵相互作用新理论

基本信息

批准号：
13876075
负责人：
馬場忠
金额：
$ 1.15万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

各種組織由来の細胞膜にはスフィンゴ糖脂質やコレステロールに富み,GPIアンカー型をはじめとするさまざまな膜結合型タンパク質を含むマイクロドメインが存在することが明らかとなっている。そのマイクロドメインは細胞内でのタンパク質輸送やシグナル伝達の場としてだけでなく,それを介した細胞間相互作用でも機能していると考えられている。精子細胞膜にマイクロドメインが存在し,それが精子と卵の相互作用で機能している可能性を見いだすことを目的として研究を行った。まず,マウス精巣上体尾部精子を1%トリトンX-100で抽出し,ショ糖密度勾配遠心にょらて低密度の界面活性剤不溶性膜(マイクロドメイン)画分を調製した。すでに作製して精子膜タンパク質ADAM2とADAM3やGPIアンカータンパク質TESP5とPH20などに対する抗体を用いて,マイクロドメイン画分のウエスタンブロット分析を行い,上記タンパク質が精子マイクロドメインに存在していることを明らかにした。これらのタンパク質は精子の卵丘細胞層通過や卵子透明帯通過,および透明帯結合で機能していると考えられており,マイクロドメイン自体が機能ドメインであると判断することもできる。事実,精巣上体精子のマイクロドメインが受精能獲得にしたがって精子赤道部から先体部へと徐々に移動していた。また,精子の卵透明帯通過に関与すると考えられるTESP5も,大部分が活性型としてマイクロドメインに存在していた。次いで,精子マイクロドメイン上にあるタンパク質複合体を上記の抗体を用いて単離することを試みたが,明確な結果を得ることができなかった。おそらく,強固な複合体が形成されており,抗体のエピトープをマスクしている可能性があると考えられる。

All kinds of tissues are rich in cell membrane, cell membrane, glycolipid, glycolipid, GPI, and so on. The combination of cell membrane and cell membrane is sensitive to the presence of high concentration of carbon dioxide. We should make sure that we do not need to pay attention to the level of intracellular transport, or that we can introduce the interaction between cells. we will be able to verify the performance of the machine. The existence of spermatozoa in the cell membrane, the interaction between sperm and egg, the possibility of the interaction between sperm and egg, the possibility of sperm and egg interaction, the possibility of sperm membrane interaction, the possibility of sperm-egg interaction, the possibility of sperm-egg interaction and the possibility of sperm-egg interaction. The sperm of the upper body tail was extracted from the upper body and tail of the sperm. 1% of the sperm was extracted from the upper body tail sperm, and the sugar density was matched with the heart, the low density interface activity, the insoluble membrane (insoluble membrane). The sperm membrane, ADAM2, ADAM3, GPI, antibody, sperm, sperm, The sperm cumulus cell was passed through the egg transparency test, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparency test, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell, the sperm cumulus cell was passed through the egg transparent cell. As a matter of fact, the sperm of the upper body spermatozoa can be fertilized by the sperm of the equatorial department of the equator. Sperm oocyte transparency tests were conducted to detect TESP5, and most of the active sperm were found to be active. In the second half of the week, the spermatozoa were infected with antibodies in the combination of sperm and spermatozoa, and the results were clear. Try to strengthen the complex to form a virus, and the antibody will be tested against the possibility of infection.