脳細胞外間質疑似環境でのヒト-β-secretaseのアミノロイド蓄積凝集機能の解析

模拟脑细胞外间质环境中人β-分泌酶的类氨基化合物积累和聚集功能分析

• 批准号: 08278217
• 负责人: 松本 明
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08278217/
• 关键词: βアミロイド; セリンプロテアーゼ; 脳老化; 細胞外間質; アルツハイマー病; 基質特異性; ヘパラン硫酸糖質; 蛋白分解制御

本研究計画の各研究目的について、平成8年度に達成された研究実績配下のとうりである。(1)天然βアミロイド基質の調整およびヒト脳細胞外マトリクス疑似環境の作成:天然βアミロイド基質はアルツハイマー病患者脳および各年齢正常層正常人脳より、抗βアミロイド抗体を用い免疫沈降法により精製した。細胞外マトリックスはすべてヒト由来でラミニン、フィブロネクチン類、コラーゲン類およびヘパラン硫酸プロテオグリカンを用いた。プロテアーゼは患者リンパ球及び患者脳より精製した68kDaセリンプロテアーゼを用いた。(2)天然基質凝集解析および分解解析:(1)の基質のうちβアミロイドを含むC端側ペプチド(CTPs)を用いた解析ではコラーゲン(IV)が最も高率に高分子凝集体を形成した。APPの細胞外ドメインを含む数種の断片を基質とした分解解析から、本プロテアーゼはこれら天然基質分子上のヘパラン硫酸糖質の有無によりその分解効率が変化することを見いだした。(3)糖修飾酵素を用いた解析から本プロテアーゼはそれ自信がヘパラン硫酸残基を含むアスパラギン結合糖鎖をその分子内にもつことを明らかにした。またその由来組織による差を認めなかった。(4)今後の研究の展開に関する計画:現時点デ明らかになっている本プロテアーゼの特性から、一連の血液凝固の関連するセリンプリテアーゼ群及びそれらのインヒビターを強く想起させる。今後in vivoにおける本酵素の機能を解明するため、ヒト脳の系での特異的インヒビターの検索、各構成要素の糖の変化による凝集性βアミロイドペプチドの生成量、凝集能の変化に的を絞り研究を展開させたい。

The objectives of this research project were achieved in 2008. (1)Natural β-cell matrix modification and purification by immunosedimentation The cellular environment is characterized by a variety of factors, such as the environment, environment, environment and environment. The 68kDa protein was used in the treatment of patients. (2)Analysis of aggregation and decomposition of natural matrix:(1) The matrix aggregation analysis includes C-terminal protein (CTPs).(IV) The highest rate of polymer aggregation is formed. The extracellular matrix of APP is composed of several kinds of fragments. (3)Sugar modification enzymes are used to analyze the presence of these enzymes, but they are not used to determine the presence of sulfate residues in the molecule. The origin of the organization is different. (4)Future research is planned to focus on the characteristics of the blood coagulation system and the relationship between the blood coagulation system and the blood coagulation system. In the future, the function of this enzyme in vivo will be clarified, and the system of specific enzyme activity will be studied. The amount of aggregation β-enzyme activity produced and the change of aggregation activity of each component sugar will be studied.

项目成果

Akira Matsumoto: "Human brain β-secretase contains heparan sulfate glycoconjugates" Neuroscience Letters. 211. 105-108 (1996)

Akira Matsumoto：“人脑 β-分泌酶含有硫酸乙酰肝素糖复合物”《神经科学快报》211. 105-108 (1996)。

Hisashi Takasu: "The 68-84 amino acid resion of the parathvroid hormone molecule is essential for the interaction of the hormone with the binding sites" Endocrinology. 137. 5537-5543 (1996)

Hisashi Takasu：“甲状旁腺激素分子的 68-84 个氨基酸残基对于激素与结合位点的相互作用至关重要”内分泌学。

Akira Matsumoto: "Enhanced aggregation of β-amyloid-containing paptides by extracellular matrix and their degradation by the 68 kDa serine protease" Neuroscience Letters. 220. 159-162 (1996)

Akira Matsumoto：“细胞外基质增强含 β-淀粉样肽的聚集及其 68 kDa 丝氨酸蛋白酶的降解”《神经科学快报》220. 159-162 (1996)。

Akira Matsumoto: "The 68 kDa β-secretase with heparan sulfate is expressed in serum and lymphocyte cytosol of normal aged and Alzheimer's disease patient" Alzheimer's Research. 2. 115-120 (1996)

Akira Matsumoto：“68 kDa β-分泌酶与硫酸乙酰肝素在正常老年人和阿尔茨海默病患者的血清和淋巴细胞胞浆中表达”阿尔茨海默病研究，2. 115-120 (1996)。