プロテアソームの抗原提示に於ける役割の系統発生学的解析

蛋白酶体在抗原呈递中的作用的系统发育分析

• 批准号: 08278230
• 负责人: 野中 勝
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08278230/
• 关键词: プロテアソーム; LMP7; MHC; 進化

アフリカツメガエルの卵巣、血球細胞より20Sプロテアソームを、ゲル濾過、イオン交換カラムにより部分精製し、MCA基質を用いて切断特異性の比較検討を行った。その結果、どらちのプロテアソームもキモトリプシン様の活性のみが検出されたが、卵巣由来で主にXを含むもののほうが、血球由来で主にLMP7を含むものより数倍強い活性を示した。今後、この違いがX/LMP7の入れ替えによって生じていることをタンパクレベルで明らかにすると共に、より多種の基質を用いて、特異性の違いの検出を試みたい。また、特定のLMP7とクラスIaの組み合わせが抗原提示に必要である可能性を検討するためのMHC内の組み替え体の作成を目的とした掛け合わせは戻し交配の子孫からDNAを抽出する段階まで進行し、現在タイピングを行っている。組み替え体が発見できれば、約一年後にはそのMHCをホモに持つカエルが得られる予定である。また、ツメガエルMHCの構造をより詳細に検討する目的で、クラスIa、クラスIIb、補体Bf、C4、HSP70、LMP7遺伝子間の連鎖解析を行い、MHC内で組み換えを起こしたカエルを2匹認めることにより、これらの遺伝子は3群に分けられ、クラスIa、C4が中央に位置する事が判明した。この遺伝子配置は哺乳類のMHCとは著しく異なっており、MHCは脊椎動物の進化の過程で、主要な遺伝子の連鎖は保ったまま大規模な再編を経験したことが示唆された。特にツメガエルの遺伝子配置ではクラスIaと、その上に提示される抗原のプロセシングに働くLMP7の遺伝子が互いに近接して存在することが示唆された。これがMHCの原型に近いものと考えられた。

A comparative study was conducted on the specificity of cleavage in the plasma, blood cells, blood filtration, blood exchange, partial purification and MCA matrix. As a result, the activity of LMP 7 was detected by the enzyme, and the activity of LMP 7 was detected by the enzyme. The activity of LMP 7 was detected by the enzyme. In the future, X/LMP 7 will be replaced by X/LMP 7, which will be replaced by X/LMP 7, which will be replaced by X/LMP 7. The specific LMP 7 and LMP Ia are assembled to indicate the need for antigen, the possibility of assembly, the purpose of assembly of MHC, and the sequence of DNA extraction. The group was replaced by MHC after about one year. The structure of MHC is discussed in detail. The genetic linkage among MHC genes is discussed in detail. The MHC of mammals is different, and the MHC of vertebrates is different from the evolutionary process of vertebrates. The linkage of major genes is different from that of large-scale recombination. In particular, the presence of LMP 7 in the presence of a protein. MHC prototype

项目成果

Hatanaka, M. et al.: "Mechanism by which the surface expression of the glycosylphoshatidyl-inositol-anchored complement regylatory proteins decay accelerating factor (CD55) and CD59 is lost in human leukemia cell lines." Biochem. J.314. 969-976 (1996)

Hatanaka, M. 等人：“糖基磷脂酰肌醇锚定的补体调节蛋白衰变加速因子 (CD55) 和 CD59 的表面表达在人类白血病细胞系中丢失的机制。”

Kuroda,N.,et al.: "Molecular cloning and linkage analysis of the Japanese medaka fish complement Bf/C2 gene." Immunogenetics. 44. 459-467 (1996)

Kuroda,N.,et al.：“日本青鳉鱼补体 Bf/C2 基因的分子克隆和连锁分析。”

Mo, R. et al.: "Fourth component of Xenopus laevis complement : cDNA cloning and linkage analysis with frog MHC." Immunogenetics. 43. 360-369 (1996)

Mo, R. 等人：“非洲爪蟾补体的第四种成分：cDNA 克隆和与青蛙 MHC 的连锁分析。”

Kandil, E. et al.: "Isolation of low molecular mass polypeptide cDNA clones from primitive vertebrates. Implication for the origin of MHC class rostricted antigen presentation." J. Immunol. 156. 4245-4253 (1996)

Kandil, E. 等人：“从原始脊椎动物中分离低分子量多肽 cDNA 克隆。对 MHC 类限制性抗原呈递起源的影响。”

Hosokawa, M. et al.: "Molecular cloning of guinea pig membrane cofactor protein (MCP) : Preferential expresstion in testis." J. Immunol.157. 4946-4952 (1996)

Hosokawa, M. 等人：“豚鼠膜辅因子蛋白 (MCP) 的分子克隆：睾丸中的优先表达。”