酵母染色体テロメアの機能構造とその制御機構の解明

阐明酵母染色体端粒的功能结构和控制机制

• 批准号: 11239201
• 负责人: 松浦 彰
• 金额: $ 29.82万
• 依托单位: National Institute for Longevity Sciences,NCGG (2000-2003)Tokyo Institute of Technology (1999)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11239201/
• 关键词: 分裂酵母; 出芽酵母; テロメア; ATMファミリータンパク質; MRX複合体; テロメラーゼ; 細胞周期チェックポイント; ATM familyタンパク質; Rad50; ATM相同因子; ヘテロクロマチン; チェックポイント

テロメアは真核生物線状染色体の末端を構成するDNA・タンパク質複合体であり、その構造維持は染色体の正常な機能にとって必須である。我々は分裂酵母、出芽酵母を材料に、テロメアDNAの維持機構の解析を行っている。今年度、出芽酵母においてテロメア関連タンパク質をエピトープタグ付加した形でかつ内在性プロモーターにより生理的レベルで発現する酵母細胞を構築し、さらにテロメア構造異常をもたらす遺伝的バックグラウンドでそれらのタンパク質を発現させ、その挙動を網羅的に解析し、関連タンパク質相互のネットワークを明らかにした。その結果、以下に示す重要な知見を得た。(1)ATMファミリータンパク質Mec1pは細胞周期のS期の時期に特異的にテロメアと結合し、他の時期はMec1pの代わりにTel1pがテロメアと結合している。両者のテロメア結合は拮抗的であり、Mec1pのキナーゼ活性の細胞周期変動によりテロメア結合が制御されている。(2)酵母のテロメア短縮変異株est2、yku70において、Mec1pが通常結合していない細胞周期上の時間帯にテロメアに結合している。(3)Mec1pのテロメア局在化はテロメラーゼ制御因子のテロメアローディングに重要である。このことから、Mec1pがテロメア複製のためのタンパク質複合体制御に関与することを示した。一方、分裂酵母を用いた解析では、taz1破壊株のテロメア末端の1本鎖突出はRad32依存的であるが、Rad32のヌクレアーゼドメインは必要でないことを示し、分裂酵母Nbs相同蛋白質nbs1の破壊株がrad50遺伝子やrad32破壊株と同様の表現型を示すことを明らかにした。また、RPAのlarge subunitをコードするrad11遺伝子の新たな突然変異を単離し、RPAがテロメア長の制御に関わることを示した。

The structure of the terminal of a eukaryotic linear chromosome is necessary to maintain the normal function of the chromosome. The analysis of DNA maintenance mechanism in yeast and budding materials In this year, budding yeast cells are constructed and structurally abnormal in yeast cell structure, and the analysis of the relationship between budding yeast cells and their properties is carried out. The results below show important insights. (1) ATM cell cycle is characterized by specific binding at S phase of the cell cycle, and by binding at other phases of the cell cycle. The cell cycle activity of MEC 1 p is controlled by the combination of the two. (2)Yeast mutant est 2, yku 70, mec 1 p, and so on. (3) Mec 1 p is important in controlling factors. This is the first time I've ever seen a woman who's been in a relationship with a woman who's been in a relationship with a woman. The expression of the same protein in Nbs 1 and Nbs 1 of the same strain is shown in the expression of the same protein in rad 50 and rad 32. The RPA's large subunit has a new and unusual structure.

项目成果

Kibe T, et al.: "Fission yeast Rhp51 is required for the maintenance of telomere structure in the absence of the Ku heterodimer."Nucl.Acids Res.. 31. 5054-5063 (2003)

Kibe T 等人：“在没有 Ku 异二聚体的情况下，裂殖酵母 Rhp51 是维持端粒结构所必需的。”Nucl.Acids Res.. 31. 5054-5063 (2003)

M. Kawai, A. Nakashima, M. Ueno, T. Ushimaru, K. Aiba, H. Doi, M. Uritani.: "Fission yeast Tor1 functions in response to various stresses including nitrogen starvation, high osmolarity, and high temperature"Current Genetics. 39. 166-174 (2001)

M. Kawai、A. Nakashima、M. Ueno、T. Ushimaru、K. Aiba、H. Doi、M. Uritani.：“裂殖酵母 Tor1 可以响应各种应激，包括氮饥饿、高渗透压和高温”

Hayashi E, et al.: "Loss of p27^<Kip1> accelerates DNA replication after partial hepatectomy in mice."J.Surg.Res.. 111. 196-202 (2003)

Hayashi E 等人：“小鼠部分肝切除术后 p27^<Kip1> 的丢失加速 DNA 复制。”J.Surg.Res.. 111. 196-202 (2003)

Sekoguchi E, et al.: "A novel mitochondrial carnitine-acylcarnitine translocase induced by partial hepatectomy and fasting."J.Biol.Chem.. 278. 38796-28802 (2003)

Sekoguchi E 等人：“部分肝切除术和禁食诱导的新型线粒体肉碱-酰基肉碱转位酶。”J.Biol.Chem.. 278. 38796-28802 (2003)

Nakashima A, Ueno M, Ushimaru T, Uritani M: "Involvement of a CCAAT-binding complex in the expression of a nitrogen-starvation-specific gene, isp6^+, in Schizosaccharomyces pombe"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 66. 2224-2227 (2002)

Nakashima A、Ueno M、Ushimaru T、Uritani M：“裂殖酵母中 CCAAT 结合复合物参与氮饥饿特异性基因 isp6^ 的表达”Biosci。