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胎児性間葉系幹細胞の心筋への分化と生体内の心拍動とのシンクロナイゼーション

胎儿间充质干细胞同步分化为心肌和体内心跳

基本信息

批准号：
13022264
负责人：
梅澤明弘
金额：
$ 2.69万
依托单位：
National Research Institute for Child Health and Development (2002)Keio University (2001)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

TERT、E6、E7、およびBmiを遺伝子導入することにより寿命を延長したヒト骨髄間葉系幹細胞を用いてin vitroとin vivoにおいて心筋に分化するかどうかを検討する。ヒト骨髄間葉系細胞を限外希釈法でサブクローニングをして得られた細胞に、レトロウィルスを用いてTERT、E6、E7、およびBmiを遺伝子導入した。得られたヒト寿命延長骨髄間葉系幹細胞をGFPで標識し、マウス胎児心筋細胞と共培養することで心筋へ分化させ、さらに免疫組織化学を用いて抗心筋トロポニン抗体で評価した。また、免疫不全マウスの心筋にヒト寿命延長骨髄間葉系幹細胞を注射し、心筋への分化を免疫組織化学により評価した。in vitroでGFP陽性細胞は2日後に筋管細胞様に延長し、7日後には拍動する細胞を認めた。免疫組織化学では抗心筋トロポニン抗体陽性であった。また、in vivoにおいても抗心筋トロポニン抗体と抗β2ミクログロブリン抗体陽性の移植細胞が認められた。以上のことより、寿命延長したヒト骨髄間葉系幹細胞は心筋に分化し得ると結論づけられる。心筋細胞がin vitroで大量に確保できるという状況が現れれば、それらの細胞を用いた細胞移植という方法論で、末期重症心不全の治療に用いることが可能であろう。In vivoにおいて、胎児心筋細胞を用いて心臓への移植の可能性が証明されて以来、遺伝子を導入した細胞、骨格筋細胞、平滑筋細胞、無処置の骨髄細胞などがドナー細胞として用いられてきた。また、胎児性幹細胞を用いた実験も報告されているが、倫理的な問題を含んでいる。

TERT, E6, E7, and other Bmi cells are used to extend the life span of each cell and to use the in vitro cell to differentiate the cells of the cell. There is a limit on how to use TERT, E6, E7, and Bmi devices to register in your home. In order to prolong the life span of embryos, the GFP markers were prolonged, the hearts of fetuses were co-cultured, the hearts were differentiated, and the immunocytochemistry was tested with anti-cardiomyocytes antibodies. The life span of immune deficiency syndrome was prolonged, the life span of bone marrow cells was prolonged, and the differentiation of heart disease was detected by immunocytochemistry. After 2 days, the cell length of in vitro GFP cells was lengthened, and after 7 days, the cell cycle was confirmed. The anti-cardiomyopathy antibody was detected by immunohistochemical staining. Anti-β 2 antibody, anti-β 2 antibody. The differentiation of the hearts and minds of the cells of the above-mentioned aging and life-prolonging children has been successful in the conclusion of the study. A large number of patients with severe cardiac insufficiency were treated with in vitro, and the treatment of severe heart insufficiency at the end of the disease. Since the possibility of transplantation of In vivo and fetal heart muscle cells, they have been introduced into bone cells, bone cells, smooth muscle cells, bone cells, and so on. Pregnant women, pregnant women and pregnant women.