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Ewing肉腫/PNETの本態解明と癌化に関わるキメラ遺伝子の同定

阐明尤文肉瘤/PNET 的真实性质并鉴定参与癌化的嵌合基因

基本信息

批准号：
07670221
负责人：
梅澤明弘
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670221/
关键词：
Ewing肉腫 EWS E1A-F 転座

项目摘要

思春期に好発する難治性腫瘍であるEwing肉腫/PNET腫瘍群には,特徴的な染色体異常t(11;22), t(21;22)及びt(7;22)が存在し.それに由来するEWS遺伝子(22番染色体)と,etsファミリーであるFLI-1(11番染色体),ERG(21番染色体),ETV-1(7番染色体)とのキメラ遺伝子の発現が確認されている.その遺伝子をRT-PCRによって同定し,腫瘍の確定診断に用いること,また新たな腫瘍特異的キメラ遺伝子の単離を目的として研究を行った.26例のEwing肉腫/PNET腫瘍群の手術症例と14細胞株からtotal RNAを抽出し,RT-PCRを行った.これらの80%に既知のキメラ遺伝子を同定し,全ての塩基配列を決定した.これらの結果は,キメラ遺伝子が腫瘍群の特異的な指標となること,また遺伝子診断に有用であることを明らかにした.塩基配列の決定により,これらのキメラ遺伝子はすべてin frameであることが明らかになり,同遺伝子が腫瘍発生に重要な役割を果たしている事も示唆する結果となった.さらに,既知の遺伝子を同定できない症例についてEWSをプローブとしてサザン解析を行い,EWS遺伝子に再構成を認めた例についてnested PCRを試み,クローニング後に塩基配列を決定した.その結果,一例より新たなキメラ遺伝子EWS/E1A-Fを単離した(GenBank no. U35622).

Chromosome abnormalities t(11;22), t(21; 22) and t(7;22) characteristic of Ewing/PNET tumors were present. The origin of EWS gene (chromosome 22),ets, FLI-1(chromosome 11),ERG(chromosome 21),ETV-1(chromosome 7) and the occurrence of EWS gene were confirmed. RT-PCR was used to determine the total RNA in 26 cases of Ewing/PNET tumors and total RNA was extracted from 14 cell lines. 80% of the time, we know that all the information we need is the same, and all the information we need is the same. The results are as follows: 1. The specific index of tumor group is useful for diagnosis of tumor group. The decision of the base alignment is made in the following way: the first step is to make a decision in the frame, the second step is to make a decision in the frame, and the third step is to make a decision in the frame. In addition, the EWS gene is identified and analyzed in the case of a known gene, and the EWS gene is reconstructed in the case of a known gene. The results showed that a new gene EWS/E1A-F was identified (GenBank no. U35622).