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骨髄に由来するCMG細胞の心筋への分化と生体内の心拍動とのシンクロナイゼーション

骨髓来源的 CMG 细胞在体内同步分化为心肌和心跳

基本信息

批准号：
11167274
负责人：
梅澤明弘
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

分子生物学の発達により遺伝子操作動物や人工臓器の研究が進歩し、細胞の運命を人工的に転換させることが可能となったが、心筋細胞においては他の細胞を心筋に転換しうる強力な遺伝子は発見されておらず、人工的に心筋細胞を作ることは不可能をされてきた。この常識を覆し、心筋以外の細胞を心筋細胞に転換させる技術を研究開発してきた。骨髄間質細胞は、発生学的には将来、血球・血管に分化する血島細胞と呼ばれる細胞群に由来する細胞である。本研究の目的は多分化能を有する骨髄間質細胞に分化誘導を加えることにより、自己拍動を有する心筋細胞を作成し、その表現型の解析、心筋細胞移植への方法を確立することである。骨髄間質細胞は付着細胞であり、血球系の細胞を除去した後、3ヶ月以上の長期培養を行った。長期培養後、不死化した細胞による多クローンの細胞株を作成し、その中からサブクローニングを反復した。得られたサブクローンの中から自己拍動をする割合が高いクローンを最終的にCMG細胞と命名した。CMG細胞は5-azacytidine による最終的な分化誘導を行う以前には単核の線維芽細胞の形状を呈したが、分化とともに形態は著しく変化した。分化誘導後2週になると既にこうした細胞の多くは自己拍動を開始した。興味深いことに、この自己拍動を開始した細胞が互いに連結しあい、縦に連結し筋管細胞状を呈したことである。3週では多くの細胞が縦に一列に並び、同期して収縮した。CMG筋管細胞は分岐により他の筋管細胞と結合し、全体としては網の目状の外観を呈した。筋管の長さは最長のもので3mmに達し、拍動数120-250/分で収縮した。ガラス微小電極を用いて記録したCMG筋管細胞の活動電位は洞結節細胞型と心室筋細胞型の2種類に大別された。

In molecular biology, there is a lot of progress in the study of artificial animals, and the cell life is very important in the study of artificial animals. It is possible that the cells of the heart do not know how to operate, and that it is impossible to use the artificial cells of the heart to do the research. Every day, every day The origin of the cell population is due to the differentiation of blood vessels, the differentiation of blood cells and blood vessels. The purpose of this study is to establish the method of multi-differentiation, such as cell differentiation, cell differentiation and cell transplantation. Long-term training of bone marrow cells for more than 3 months after the removal of bone marrow cells and hematopoietic cells. After long-term cultivation, the cells of the immortalized plants were formed, and the cells were treated in the middle of the culture. If you want to make sure that you can do this by yourself, you have to cut and close the most popular CMG cell name in your computer. The most popular differentiation guide of CMG cell line 5-azacytidine cell line. Before that, the shape of cell line maintenance germ cell was in the shape of cell line, and the shape of differentiation cell was changed. After differentiation, two days after differentiation, the cells of the existing parents do more than one's own action to start. There is a deep smell, and when you start your own action, the cells are connected to each other, and the ribs and tubes are in the shape of cells. 3. The number of cells is different from each other, and at the same time, the number of cells is different. CMG tendon cell bifurcation and other tendon cell bifurcation are combined, and all the cells are in the shape of an eye, and the outer cells are in the shape of an eye. The length of the ribs and pipes is the longest, the maximum is 3mm, and the number of beats is 120-250 per minute per minute. The microelectrode was used to record the activity of the CMG tendon cell, the hole cell, the ventricular tendon cell, the ventricular tendon cell, the second cell, and so on.