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ヒト子宮内膜細胞による骨格筋再生と筋ジストロフィーに対する細胞治療の基盤的研究

利用人子宫内膜细胞进行骨骼肌再生和肌营养不良症细胞治疗的基础研究

基本信息

批准号：
04F04547
负责人：
梅澤明弘
金额：
$ 1.02万
依托单位：
National Research Institute for Child Health and Development
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、子宮内膜細胞の寿命延長することにより細胞増殖させ、筋ジストロフィーに対する細胞治療の基盤的研究を行うことである。昨年度に引き続き、今年度も、子宮内膜由来細胞の分離培養、細胞のプロファイリングの確定後、遺伝子導入による細胞寿命延長の検討と拒絶についても検討を行った。In vitroの検討により、子宮内膜細胞の骨格筋マーカー(MyoD, desmin, myogenin, CD56)の発現を確認した。さらに、ヒト子宮内膜細胞を筋ジストロフィーマウスへ移植し、その具体的な実験手法を確立した。ヒト子宮内膜細胞を皮下・筋肉注射によりNOD/SCID IL-2γノックアウトマウスへ移植し、移植する細胞量・移植部位の検討を行った。その後、移植部位周辺を固定、包埋、薄切、染色し、移植した子宮内膜細胞の変化を調べた。その結果、移植した細胞からCD34(Human特異)、Vimentin(マウス細胞と反応しない)陽性が見られた。またdystrophin(Human特異)陽性骨格筋細胞も発現され、骨格筋への分化の可能性を示した。これらの結果は将来筋ジストロフィーなどの疾患への細胞治療に極めて重要な意味を持つと考えられる。また、調整したヒト子宮内膜細胞をモデルマウスへ移植し、特に拒絶を含めた免疫学的な視野から検討した結果生着した。dystrophinの発現を認めた。細胞の調整、プロファイリング、遺伝子導入による細胞動態および安全性を明らかにすることができた。

The purpose of this study is to extend the life span of endometrial cells and to study the basis of cell therapy. Last year and this year, we conducted various discussions on the isolation and culture of endometrial-derived cells, the determination of cell labeling, and the investigation and rejection of cell life extension during gene introduction. In vitro detection, the development of endometrial cells (MyoD, desmin, myogenin, CD56) was confirmed. In addition, the endometrial cells were transplanted into the uterus, and the specific methods were established. Endometrial cells were injected subcutaneously into the muscle, and NOD/SCID IL-2γ was used to determine the number of cells transplanted and the site of transplantation. After transplantation, the periphery of the transplant site was fixed, embedded, thinly cut, stained, and the endometrial cells were transferred. Results: Transplanted cells were CD34 (Human specific) and Vimentin(anti-human) positive. Dystrophin(Human specific) positive skeletal muscle cells developed and the possibility of skeletal muscle differentiation was demonstrated. The results of this study are extremely important for cell therapy in the future. The results of endometrial cell transplantation, especially rejection, include immunology. Dystrophin is revealed. Cell dynamics and safety in cell regulation, gene transfer and gene transfer