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再生医療・細胞移植に対する病理学的な評価システムの確立

再生医学与细胞移植病理评价体系的建立

基本信息

批准号：
14657051
负责人：
梅澤明弘
金额：
$ 2.18万
依托单位：
National Research Institute for Child Health and Development
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

再生医療において移植細胞の生体内での局在を検出するシステムはいまだ確立されていない.移植細胞源として期待される骨髄間質細胞を生体外にて超常磁性体酸化鉄(SPIO)でラベルした後、モデル動物へ移植しMRIによる追跡が可能か否かを検討した.方法として、ヒト骨髄より採取した骨髄間質細胞を用い、SPIOであるResovistを培養液に添加し、細胞内への導入を行った.ラベル細胞の造影効果はNMR spectrometerにてT2緩和時間を測定した.ラベル細胞を免疫不全マウスの大腿部筋層内に注入し、T2-weighted fast spin-echoにてMRイメージングを行うとともに組織像との比較を行った.Resovist導入開始24時間で98%の細胞に鉄染色陽性を確認し、spectrometerにて細胞量に依存したT2短縮効果を認めた.移植後はT2強調像にて移植部位に境界明瞭な低信号領域が描出され、組織学的にも同領域に生存する移植細胞の局在を確認した.低信号領域は移植後8週にても描出されていたが、組織学的には移植後2週以降、宿主由来と思われる鉄染色強陽性細胞の増加が見られ、MRI画像が正確に移植細胞を反映しているとは言えなかった.以上のことより、結論として生体内外において細胞に導入されたSPIOの造影効果が維持され、MR画像にて描出できることが明らかになった.マウス移植モデルにおいては、MR信号減弱が移植細胞由来であると判断できるのは1週以内であったが、移植初期の細胞局在を確認するシステムとしては有効であることが明らかになったことは、「再生医療・細胞移植に対する病理学的な評価システムの確立」にとって極めて重要な意味があると考える.

Regenerative medicine in vivo transplantation of cells in the detection of the status quo is established. The source of transplanted cells is expected to be found in bone marrow stromal cells in vitro, and the possibility of tracing after transplantation into animals is discussed. Methods: To select the culture medium of bone marrow stromal cells, to add SPIO to the culture medium, and to introduce intracellular protein. T2 relaxation time was measured by NMR spectrometer. 98% of the cells stained positive for iron were confirmed 24 days after Resovist introduction, and T2-weighted fast spin-echo was detected. After transplantation, the T2-enhanced imaging showed that the low signal area of the transplanted cells was identified, and the survival of the transplanted cells was confirmed by histology. Low signal areas were detected 8 weeks after transplantation, histological findings were detected 2 weeks after transplantation, host origin was detected, iron staining was detected, MRI images were detected correctly, and transplanted cells were detected. The results of SPIO imaging were maintained in vivo and in vitro. MR signal attenuation is important for determining the origin of transplanted cells within one week, and for confirming the initial stage of transplantation.