膜と細胞骨格の制御因子としてのホスホイノシチド特異的ホスホリパーゼCのマシナリー

磷酸肌醇特异性磷脂酶 C 作为膜和细胞骨架调节剂的机制

基本信息

  • 批准号:
    13033035
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2001
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2001 至 2002
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

膜と細胞骨格の制御因子として注目を集めているδ型ホスホリパーゼC(PLCδ1)の活性化と、それにともなう膜直下構造の変化について解析した。1.自由生活アメーバA. proteusの細胞運動に関わるホスホイノシチドシグナリングについて、原子間顕微鏡と近接場顕微鏡による細胞膜ルーメンの観察、蛍光性PtdIns(4,5)P2やIns(1,4,5)P3の細胞内へのマイクロインジェクションにより、以下の点を明らかにした。アメーバは仮足を伸長させることにより貪食と移動を行うが、この細胞運動では,仮足先端のPtdIns(4,5)P2がホスホリパーゼC(PLC)により分解されることが重要であり、仮足伸張は、PtdIns(4,5)P2を介して膜に結合していたアクチン繊維の解離によって惹起され、産生されたIns(1,4,5)P3によるCa^<2+>動員を介したPLC活性化の正のフィードバックにより維持される。2.PtdIns(4,5)P2とPLCδ1との結合にクリティカルであるプレクストリンホモロジー(PH)ドメインとの相互作用を固体NMRにより解析した。脂質ベジクル結合によってPLCδ1-PHの局所立体構造は変化し、ドメイン側方にあるαヘリックスが脂質の疎水的な環境により親和性をもつことが判明した。3.PLCδ1結合タンパク質p122RhoGAPが、細胞膜マイクロドメインのひとつであるカベオラに存在することを明らかにした。その局在には、p122RhoGAPのSTARTドメインがコレステロールと結合すること、またおそらくGAPドメインがカベオリン1と相互作用することが重要である。
Membrane と cells bone の suppression factor と し て attention を set め て い る delta type ホ ス ホ リ パ ー ゼ C delta 1 (PLC) の activeness と, そ れ に と も な う membrane by tectonic の variations change に つ い て parsing し た. 1. Free Living アメ アメ バA. Proteus の cell movement に masato わ る ホ ス ホ イ ノ シ チ ド シ グ ナ リ ン グ に つ い て, between atoms 顕 micromirror と nearly meet 顕 micromirror に よ る membrane ル ー メ ン の 観 examine, 蛍 optical PtdIns (4, 5) P2 や Ins (1, four, five) P3 の intracellular へ の マ イ ク ロ イ ン ジ ェ ク シ ョ ン に よ り, を Ming ら の point below Youdaoplaceholder0 に た. ア メ ー バ は 仮 foot を elongation さ せ る こ と に よ り gluttony と mobile line を う が, こ の cell movement で は, 仮 foot apex の PtdIns (4, 5) P2 が ホ ス ホ リ パ ー ゼ C (PLC) に よ り decomposition さ れ る こ と が important で あ り, 仮 foot stretching は, PtdIns (4, 5) P2 を interface し て membrane に combining し て い た ア ク チ ン 繊 d の dissociation に よ っ て provoked さ れ, produce さ れ た Ins (1, four, five) P3 に よ る Ca ^ 2 + > < mobilization を interface し た PLC activeness の is の フ ィ ー ド バ ッ ク に よ り maintain さ れ る. 2. PtdIns (4, 5) P2 と PLC delta 1 と の combining に ク リ テ ィ カ ル で あ る プ レ ク ス ト リ ン ホ モ ロ ジ ー (PH) ド メ イ ン と の を interaction between solid NMR に よ り parsing し た. Lipid ベ ジ ク ル combining に よ っ て PLC delta 1 - PH の bureau three-dimensional structure は - し, ド メ イ ン lateral に あ る alpha ヘ リ ッ ク ス が lipid の な 疎 water environment に よ り affinity を も つ こ と が.at し た. 3. The PLC delta 1 combined タ ン パ ク qualitative p122RhoGAP が, cell membrane マ イ ク ロ ド メ イ ン の ひ と つ で あ る カ ベ オ ラ に exist す る こ と を Ming ら か に し た. そ の bureau in に は, p122RhoGAP の START ド メ イ ン が コ レ ス テ ロ ー ル と combining す る こ と, ま た お そ ら く GAP ド メ イ ン が カ ベ オ リ ン 1 と interaction す る こ と が important で あ る.

项目成果

期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Okada M et al.: "Carboxyl-terminal basic amino acids in the X domain are essential for the nuclear import of phospholipase C deltal"Genes Cells. 7(9). 985-996 (2002)
Okada M 等人:“X 结构域中的羧基末端碱性氨基酸对于磷脂酶 C deltatal 的核输入至关重要”Genes Cells。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kawakatsu T.et al.: "Interaction of actin filaments with the plasma membrane in Amoeba proteus"Cell Structure and Function. 26(in press). (2001)
Kawakatsu T.等人:“变形虫中肌动蛋白丝与质膜的相互作用”细胞结构和功能。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yagisawa H et al.: "Regulation of the intracellular localization of phosphoinositide-specific phospholipase C deltal"Adv. Enzyme Regl. 42. 261-284 (2002)
Yagisawa H 等人:“磷酸肌醇特异性磷脂酶 C delta 细胞内定位的调节”Adv.
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Akahane S.et al.: "A novel neutral amino acid transporter from the hyperthermophilic archaeon Thermococcus sp. KS-1"J.Biochem.. (印刷中). (2003)
Akahane S. 等人:“来自超嗜热古菌 Thermococcus sp. KS-1 的新型中性氨基酸转运蛋白”J.Biochem..(印刷中)。
  • DOI:
  • 发表时间:
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kamata K.et al.: "Cycloprodigiosin hydrochloride suppress tumor necros is factor(TNF)alpha-induced transcriptional activation by NF-KB"FEBS Lett.. 507(1). 74-80 (2001)
Kamata K.等人:“盐酸环菌红抑制肿瘤坏死是由 NF-KB 因子 (TNF)α 诱导的转录激活”FEBS Lett.. 507(1)。
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