好中球活性化因子LECTスレセプターのX線結晶構造解析

本研究では、サイトカインLECT2(leukocyte cell-derived chemotaxin 2)の高次構造解析を、核磁共鳴スペクトル(NMR)とX線結晶構造解析を用いて行った。慢性関節リュウマチ患者においては、LECT2の58番目のVal残基がIle残基に置換されている患者ほど、疾病の重篤度が高いことが明らかになった。LECT2の機能発現に58番目のVal残基のメチレン基1つ分の役割がいかに重要かを明らかにし、LECT2とリュウマチとの因果関係を突きとめる為にLECT2の立体構造を明らかにすることを目的とした。本研究により、1)NMRを用いた高次構造解析については、安定同位体標識したサンプル調製法の確立とNMR測定とスペクトルの解析を行った。主鎖のスペクトル帰属はほぼ完了し、二次構造情報まで得られた。2)X線結晶構造解析については、動物細胞による発現系を用いて前年度から引き続き進めており、位相決定に向けて結晶化条件の精密化を行った。その結果、以前よりも大きく良質な結晶を得ることに成功した。

本研究では、サイトカインLECT2(leukocyte cell-derived chemotaxin 2)の高次構造解析を、核磁共鳴スペクトル(NMR)とX線結晶構造解析を用いて行った。慢性関節リュウマチ患者においては、LECT2の58番目のVal残基がIle残基に置換されている患者ほど、疾病の重篤度が高いことが明らかになった。LECT2の機能発現に58番目のVal残基のメチレン基1つ分の役割がいかに重要かを明らかにし、LECT2とリュウマチとの因果関係を突きとめる為にLECT2の立体構造を明らかにすることを目的とした。本研究により、1)NMRを用いた高次構造解析については、安定同位体標識したサンプル調製法の確立とNMR測定とスペクトルの解析を行った。主鎖のスペクトル帰属はほぼ完了し、二次構造情報まで得られた。2)X線結晶構造解析については、動物細胞による発現系を用いて前年度から引き続き進めており、位相決定に向けて結晶化条件の精密化を行った。その結果、以前よりも大きく良質な結晶を得ることに成功した。