权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

超高感度化学発光検出によるmRNAのマイクロアレー解析

使用超灵敏化学发光检测对 mRNA 进行微阵列分析

基本信息

批准号：
14011241
负责人：
甲斐雅亮
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14011241/
关键词：
mRNA DNA マイクロアレー化学発光検出ハイブリダイゼーション遺伝子

项目摘要

本研究では、核酸のハイブリダイゼーションアッセイおいて分子数レベルのmRNAの検出を可能にする新手法を開発することを目的としている。そこで本研究では、当研究室で既に見い出している核酸の新しい発光試薬TMPGによる化学発光反応を適用して、特定遺伝子テロメアの高感度ハイブリダイゼーションアッセイ検出法の開発研究を行った。TMPG試薬はグアニン塩基を特異的に発光性に導くので、グアニン塩基を含まないテロメアのcDNA[(CCCTAA)n]を膜に固定し、テロメアDNAとハイブリダイズさせれば、テロメアDNAを特異的に検出できるものと想定した。さらに、この方法では、ゲノムDNAを電気泳動せずに直接テロメアDNAを測定することが可能で、細胞分裂によって短縮するテロメアDNAの長さに応じて、それに比例した発光シグナルを得ることも期待できた。そこで、TMPG試薬によるテロメアDNAのハイブリダイゼーションアッセイ系の感度を増大させるために、アビジンタンパク質とピオチン化長鎖DNAを用いて、テロメアDNAのシグナル増幅反応について検討した。これはTMPG試薬の特性を活かした増幅反応で、ターゲットDNAにさらに多量のグアニン塩基を含む長鎖DNAを連鎖的に結合させ、発光強度を増大させることを期待したものである。検討の結果、ハイブリダイゼーションアッセイによるテロメアの検出感度を約千倍増幅することが可能であった。これにより、mRNAや特定DNAのマイクロアレー解析に対する新規の超高感度化学発光検出法の開発が期待できる。

In this study, nucleic acids and nucleic acids were used to detect the number of molecules in mRNA. It is possible to use new methods to open up new strategies. In the course of this study, when the laboratory has developed a new method of nucleic acid synthesis, TMPG chemical reaction, chemical reaction, and specific chemical reactions, the high sensitivity of the research has been carried out. The optical properties of the TMPG device, the optical property, the optical property, the optical property, The DNA electrophoretic assay, the direct DNA assay, the cell division assay, the short-term response, the long-term response of the DNA, the proportion of the cells, the temperature, the temperature and the temperature. This is the first time that you know what you are going to do. You know, TMPG, you know, you know, you know In terms of the characteristics of the TMPG, the characteristics, the amplitude response, the DNA, the multi-factor, the combination of the long DNA link, the light intensity, the light intensity, the width, the The results show that the sensitivity is about a thousand times higher than that of the others, and the sensitivity is about a thousand times higher. In this paper, we use the method of ultra-high sensitivity chemiluminescence for the analysis of new regulations, such as mRNA and specific DNA detection methods.