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放線菌ストレプトミセス・グリセウスのA-ファクター制御カスケードの網羅的解明

全面阐明放线菌灰色链霉菌中 A 因子调控级联

基本信息

批准号：
14014206
负责人：
堀之内末治
金额：
$ 4.48万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

放線菌Streptomyces griseusの抗生物質生産と形態分化は、自身の生産する化学調節物質A-ファクターによりスイッチ・オンされる。本研究は、A-ファクター制御カスケード内の遺伝子を網羅的に解明することであり、本年度の成果は以下のようにまとめられる。(1)A-ファクターレセプター(ArpA)は、同時に転写調節因子として機能する。ArpAのホモログであるCprBの結晶化、3次元構造を解明した。CprBはダイマー構造をとり、N末側のヘリック-ターン-ヘリックスのDNA結合ドメイン、C末側のA-ファクター結合ドメインと考えられる疎水性ポケットを含む調節ドメインから成っていた。この構造決定により、我々がこれまでに提唱してきたArpAによる転写制御モデルの正しさが裏付けられた。(2)ArpAは下流の転写因子AdpAを誘導させる。AdpAの標的遺伝子として亜鉛結合型金属プロテアーゼ(SgmA)および気中菌糸内の隔壁形成に必須な15kDaのタンパク質(AsgA)を単離、同定し、これらの転写制御様式を解明するとともに、遺伝子破壊によりその遺伝子機能を決定した。(3)A-ファクターによってその生合成が調節される黄色色素の構造を決定したところ、フェノキサジノン骨格を有する新規化合物であり、フェノキサジノンと名付けた。本色素の生合成遺伝子のほぼ全体をクローニングし、予備的な転写解析を行ったところ、生合成遺伝子と考えられるこれらすべての遺伝子はA-ファクターおよびAdpAに依存的に転写された。系全体の調節遺伝子と考えられるgrxRを同定しており、現在、AdpAによる直接制御か否かを検討中である。さらに、これらの生合成遺伝子はリン酸濃度の低い条件でのみ転写されるため、抗生物質生合成とリン酸との関連を解明するための格好の材料として期待される。

Production, morphological differentiation and production of antibiotic substances by Streptomyces griseus This study aims to clarify the reasons for the inclusion of genetic material in the A-list system, and the results of this year are as follows: (1)A-ArpA is a function of the adjustment factor. ArpA and CprB Crystallization and 3D Structure Analysis CprB is composed of two parts: structure, N terminal, A terminal, C terminal, and water soluble. This structure determines whether or not the product is suitable for use. (2)ArpA and AdpA are the downstream factors. AdpA's target molecule is a lead-bound metal-bound molecule (SgmA) that must be separated, identified, and controlled by a 15kDa molecule (AsgA) to form a barrier in the medium. (3)A-The structure of the yellow pigment is determined by the synthesis of the yellow pigment. The pigment is synthesized from A protein that is A-linked to a protein and prepared for analysis. All regulatory agents are regulated in the same way. Now, AdpA is controlled directly. In addition, the synthesis of antibiotics and their relationship with acid concentration are discussed in detail.