放線菌ストレプトミセス・グリセウスのA-ファクター制御カスケードの網羅的解明

全面阐明放线菌灰色链霉菌中 A 因子调控级联

• 批准号: 15013210
• 负责人: 堀之内 末治
• 金额: $ 4.48万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15013210/
• 关键词: 放線菌; ストレプトミセス・グリセウス; A-ファクター; 形態分化; 二次代謝

放線菌Streptomyces griseusの抗生物質生産と形態分化は、自身の生産する化学調節物質A-ファクターによりスィッチ・オンされる。本研究は、A-ファクター制御カスケード内の遺伝子を網羅的に解明することであり、本年度の成果は以下のようにまとめられる。1.S.griseusのゲノム配列決定に着手し、これまで約40,000サンプルにつき塩基配列決定を行った。アセンブリーと平行して、コスミドクローンの末端配列の解析を行っており、来年度中には全配列決定、遺伝子のアノテーシヨンを終了できる見込みである。2.A-ファクター制御下にある黄色色素(グリキサゾン)合成遺伝子群につき、A-ファクターシグナルを受容するシスエレメント領域を同定した。また、6個の転写単位を同定し、これら全てがA-ファクターおよび培地中のリン酸濃度に応答することを見出した。3.A-ファクターカスケード内の正の転写因子AdpAの標的遺伝子として新たにトリプシン型プロテアーゼ2種キモトリプシン型プロテアーゼ3種を見出し、A-ファクターによる転写制御様式、AdpAの結合塩基領域および遺伝子破壊による形態分化に及ぼす影響を検討した。4.A-ファクター制御カスケードとcross-talkを行うたんぱく質リン酸化系であるAfsK/AfsRにつき、TOF-MSを用いてリン酸化残基を決定した。現在同定されたアミノ酸残基に部位特異的変異を行い、最終確認を続行中である。

Production, morphological differentiation and production of antibiotic substances by Streptomyces griseus This study aims to clarify the reasons for the inclusion of genetic material in the A-list system, and the results of this year are as follows: 1. S. griseus must be arranged to determine the starting point, this time about 40,000 people are arranged to determine the basic line The analysis of the terminal arrangement of the sample is carried out in parallel, and the determination of the complete arrangement in the coming year is carried out in parallel. 2. The yellow pigment is controlled by A-color and A-color. The synthetic derivative is controlled by A-color and A-color. The six levels were determined at the same time, and the acid concentration in the medium was determined at the same time. 3. The morphological differentiation and influence of A-factor, A-factor, A- 4. A-C-R/A-C/A-C-R/A-C/A-C/A-C-R/A-C/A-C/ The site-specific variation of the amino acid residues was determined and finally confirmed.

项目成果

堀之内末治: "放線菌の真核型キナーゼは飾りではなく生育必需品"バイオサイエンスとインダストリー. 61. 330-331 (2003)

Sueharu Horinouchi：“放线菌的真核激酶不是装饰品，而是生长所必需的”《生物科学与工业》61. 330-331 (2003)。

Haruka Yamazaki: "amfR, an essential gene for aerial mycelium formation, is a member of the AdpA regulon in the A-factor regulatory cascade in Streptomyces griseus."Mol.Microbiol.. 50. 1173-1187 (2003)

Haruka Yamazaki：“amfR 是气生菌丝体形成的必需基因，是灰色链霉菌 A 因子调节级联中 AdpA 调节子的成员。”Mol.Microbiol.. 50. 1173-1187 (2003)

Jun-ya Kato: "A single target is sufficient to account for the biological effects of the A-factor receptor protein of Streptomyces griseus."J.Bacteriol.. 186(in press). (2004)

Jun-ya Kato：“单一靶标足以解释灰色链霉菌 A 因子受体蛋白的生物效应。”J.Bacteriol.. 186（出版中）。

Keith F.Chater: "Signalling early developmental events in two highly diverged Streptomyces species."Mol.Microbiol.. 48. 9-15 (2003)

Keith F.Chater：“标志着两种高度分化的链霉菌物种的早期发育事件。”Mol.Microbiol.. 48. 9-15 (2003)

Ryo Natsume: "Crystal structure of a g-butyrolactone autoregulator receptor protein in Streptomyces coelicolor A3(2)."J.Mol.Biol.. 336. 409-419 (2004)

Ryo Natsume：“天蓝色链霉菌 A3(2) 中 g-丁内酯自动调节受体蛋白的晶体结构。”J.Mol.Biol.. 336. 409-419 (2004)