酵母ミトコンドリアを巡るプロテインフラックス

酵母线粒体周围的蛋白质通量

• 批准号: 14014214
• 负责人: 吉久 徹
• 金额: $ 3.52万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014214/
• 关键词: ミトコンドリア; 膜透過; プロテオーム; ゲノム; プロテインフラックス; TOM複合体; 局在化シグナル

酵母ミトコンドリアへのタンパク質フラックスを解明する第1歩として、全ミトコンドリアタンパク質の2次元電気泳動カタログの作成を進めている。現在、精製したミトコンドリアを複数の条件下で2次元電気泳動し、解析可能な506のタンパク質スポットを得ている。このうち、既に166のスポットについて59種類のタンパク質に帰属することができた。また、2次元電気泳動では解析しにくい内在性膜タンパク質については、内在性膜タンパク質のみをSDS-PAGEで展開後、各バンドの同定を進めている。現在、これらの結果を元に、酵母ミトコンドリアタンパク質のデータベースを構築しており、将来的にはWeb上での公開を考えている。さらに、複数あることが知られているミトコンドリア外膜膜透過装置の局在化シグナル受容体が、ミトコンドリア前駆体タンパク質ごとにどのように使い分けられているかを知る目的で、シグナル受容体の一つであるTom70を欠失したミトコンドリアへの網羅的な取り込み実験を行った。全酵母mRNA由来の翻訳産物を野生型またはTom70欠失型ミトコンドリアに取り込ませ、2次元電気泳動で展開して得られた117のスポットについて定量的比較を行った。その結果、13のスポットでは、明らかにTom70欠失ミトコンドリアでの取り込みが低下していた。この内5種類については帰属ができ、いずれもプレ配列を持つタイプの前駆体であることが明らかとなった。さらに、個々のタンパク質のミトコンドリアへの取り込みを迅速に確認する為のシステムを構築し、これら5種のタンパク質がTom70に依存して取り込まれることを確認した。Tom70は主に内在性局在化シグナルを認識すると考えられてきたが、上記の結果は、プレ配列を持つ前駆体にもTom70によって認識されるサブクラスがあり、異なる受容体がサブクラス間で使い分けられていることを示唆している

The yeast system is very important to understand that the first and the second step of the swimming exercise is complete. At present, under the condition of two-dimensional swimming activity, analysis and analysis may be successful under the condition of complex data. This is the most important thing in the world, and it is very important to know that this is not the case. After two-dimensional and two-dimensional swimming analysis, the intrinsic membrane was analyzed, and the intrinsic membrane was analyzed. After the opening of the SDS-PAGE, each cycle was determined to be in progress. At present, the results show that there is a lot of money, and that there is a lot of money in the yeast industry. In the future, it will be open to the public on Web. In this case, you need to know that the external membrane is sensitive to the external membrane through the device. The device is responsible for determining the capacity of the recipient, the recipient is not aware of the purpose, and the recipient is not aware of the purpose. The recipient is unable to access the Internet through the device. The whole yeast mRNA is derived from the wild type, the wild type, the deficient type, and the two-dimensional swimming exercise, which can be used to compare the quantity of the whole yeast mRNA. The results show that 13% of the data are not valid, and that the Tom70 is missing. There are five types of information in the market, and the equipment is arranged in front of the system to make sure that the information is correct. You can quickly confirm that you can use your Tom70 to verify that you are not responsible for this, and that you need to confirm that you are not responsible for this. Tom70 said that the internal sex bureau is in the process of changing the information system, including the results, the results, and the arrangement of the previous system. The Tom70 system is in front of you.