酵母ミトコンドリアを巡るプロテインフラックス

酵母线粒体周围的蛋白质通量

• 批准号: 15013224
• 负责人: 吉久 徹
• 金额: $ 3.71万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15013224/
• 关键词: ミトコンドリア; 膜透過; プロテオーム; ゲノム; プロテインフラックス; TOM複合体; 局在化シグナル

酵母ミトコンドリアへのタンパク質フラックスを解明する第1歩として、全ミトコンドリアタンパク質の2次元電気泳動カタログの作成を進め、現在、次元電気泳動し、解析可能な506のタンパク質スポットを得、その帰属を進めている。既知の結果については、酵母ミトコンドリアタンパク質のデータベースを構築した。現在、Web上での公開に向けて、ブラウジングインターフェースなどを構築している。次に、ミトコンドリア前駆体タンパク質が複数あるミトコンドリア外膜の局在化シグナル受容体をどう使い分けているかを知る目的で、シグナル受容体の一つであるTom70を欠失したミトコンドリアへの網羅的な取り込み実験を行った。全酵母mRNA由来の翻訳産物を野生型またはTom70欠失型ミトコンドリアに取り込ませ、2次元電気泳動で展開して得られた114のスポット(うち37スポットが帰属済み)について定量的比較を行った。その結果、17のスポットでは、明らかにTom70欠失ミトコンドリアでの取り込みが低下していた。このうち帰属のできている5種類は、いずれもプレ配列を持つタイプの前駆体であることがわかった。他方、2種の未同定のスポットについては、取り込み効率が上昇した。前記5種に加え、Tom70欠失の影響が見られない10種のタンパク質について、各タンパク質のミトコンドリアへの取り込みを個別に解析することでその依存性を確認した。Tom70は主に内在性局在化シグナルを認識すると考えられてきたが、プレ配列を持つ前駆体にもTom70によって認識されるサブクラスがあることが示された。さらに、プレ配列を持つミトコンドリアタンパク質のTom70依存性は、all-or noneタイプの依存性ではなく、量的に影響されていることが明かとなった。他方、ミトコンドリアへのタンパク質フラックスに関わる既知遺伝子の多くが、酵母の生育に必須であることから、ミトコンドリアに局在する必須遺伝子を網羅的に解析し、タンパク質フラックスに関わる新たな遺伝子の探索も進行している。

The first step of the process is to analyze the properties of yeast cells and to make progress in the preparation of the 2D electrokinetic model of yeast cells. As a result, we know how to build a better environment. Now, on the Web, open to the public, open to the public, open to the public. Second, the first batch of precursor materials is separated from the second batch of precursor materials. The second batch of precursor materials is separated from the third batch of precursor materials. The third batch of precursor materials is separated from the third batch of precursor materials. The total yeast mRNA derived products were compared quantitatively with wild-type and 2-dimensional electrophoresis. As a result, the 17-point solution was found to be in the middle of the problem. The five kinds of Other, 2 kinds of different kinds of The effects of the above 5 kinds of additive and Tom70 deficiency were found in 10 kinds of additive and Tom70 deficiency, and the dependence of each additive and Tom 70 deficiency was confirmed. Tom70 is the owner of the intrinsic nature of the game in the understanding of the game, the game in the past, the game in the past, Tom70 in the understanding of the game in the past. The dependency of all or none of the dependencies of Tom70 is affected by the quantity of the column. Other aspects, such as the analysis of the number of known genes, the necessity of yeast growth, the analysis of the number of essential genes, the exploration of new genes related to quality, etc.

项目成果

遠藤斗志也 他: "ミトコンドリアをめぐるタンパク質フラックス"実験医学(増刊号「細胞内輸送-研究の最前線」). 21. 1889-1895 (2003)

Toshiya Endo 等人：“线粒体周围的蛋白质通量”实验医学（特刊“细胞内运输 - 研究前沿”）。1889-1895 年 21 月（2003 年）。