核内に存在する成熟体tRNAの生理的意義の解析II

细胞核中成熟tRNA的生理意义分析II

• 批准号: 15030218
• 负责人: 吉久 徹
• 金额: $ 3.46万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15030218/
• 关键词: 核酸; 微生物; 核; 細胞内局在化; tRNA; splicing; 核外輸送; 核内輸送; 核内翻訳

翻訳に関わるtRNAの一部はintronを持つ。このようなtRNAの成熟化に必須であるsplicingは長らく核膜近傍で起こり、成熟体tRNAの核外輸送と共役した過程だと考えられてきた。しかし、我々は、酵母Saccharomyces cerevisiaeにおいて、このsplicingに関わるtRNA splicing endonucleaseが核に局在せず、ミトコンドリア表面にあることを明らかにしてきた。これは、tRNAが成熟化後に細胞質から核へと移行することを示唆している。今年度我々は、実際に成熟体tRNAが細胞質から核へ輸送されることを、出芽酵母のヘテロカリオンアッセイ、転写阻害剤とエネルギー生産阻害剤を組み合わせたin vivo核移行アッセイなどで証明した。この中で、tRNA核内輸送はエネルギー依存、Ran GTPaseサイクル非依存であることを明らかにした。また、3'^-末端が部分的に失われたtRNAも核内に入りうることから、核内輸送とtRNAの品質管理が関係する可能性が示唆された(投稿中)。一方、tRNAのsplicingに関わるtRNA ligaseは細胞質に積極的に保持されるシグナルを有していることを明らかにした。実際、tRNA ligaseを様々な形で細胞質のオルガネラ膜に固定化しても機能することを明らかにし、tRNAのsplicingが細胞質で起こるさらなる証拠を得た。こうした知見は、tRNAの生合成に関する今までの考え方に、大きな修正を迫るものである。

訳に关わるtRNAの一一はintronをholdつ. The maturation of tRNA must be done by splicing the nuclear membrane close to the nucleus, transporting the mature tRNA outside the nucleus, and cooperating with each other.しかし、我々は、Yeast Saccharomyces cerevisiaeにおいて、このsplicingに关わるtRNA splicing Endonuclease がNUCLEAR bureau in せず, ミトコンドリア surface にあることを明らかにしてきた. After the tRNA matures, it migrates into the cytoplasm and into the nucleus. This year I 々は、実记に mature body tRNA がcytoplasm からnuclear へtransport されることを、budding yeastのヘテロカリオンアッセイ、転WRITING HANDLING 剤とエネルギー Production HIWING を组み合わせたin Vivo nuclear migration has been proved.この中で, tRNA intranuclear transport はエネルギーdependence, Ran GTPase サイクルnon-dependence であることを明らかにした.また、The 3'^-terminal portion of the tRNA is lost in the nucleus and the tRNA is transferred into the nucleus. The quality control of the tRNA in the nucleus is related to the possibility of the relationship (under submission). On the one hand, tRNA is splicing and tRNA ligase is cytoplasmic and active. RNA, tRNA ligase を様々なshaped でcytoplasmic のオルガネラmembrane にimmobilized してもfunctional することを明らかにし、tRNAのsplicingがcytoplasmicでriseこるさらなる证拠を得た.こうした知见は, tRNAの生synthetic に关する金までの考え方に, 大きなcorrection をforced るものである.

项目成果

遠藤斗志也 他: "ミトコンドリアをめぐるタンパク質フラックス"実験医学(増刊号「細胞内輸送-研究の最前線」). 21. 1889-1895 (2003)

Toshiya Endo 等人：“线粒体周围的蛋白质通量”实验医学（特刊“细胞内运输 - 研究前沿”）。1889-1895 年 21 月（2003 年）。

総論:タンパク質の移動(真核生物)-細胞内の交通管制システムがはたらく仕組み

一般性讨论：蛋白质运动（真核生物）——细胞内交通控制系统如何工作

• 发表时间: 2004
• 期刊: 蛋白質核酸酵素増刊「細胞における蛋白質の一生」
• 作者: 遠藤 斗志也;吉久 徹
• 通讯作者: 吉久 徹

T.Yoshihisa et al.: "Possibility of Cytoplasmic pre-tRNA Splicing : the Yeast tRNA Splicing Endonuclease Mainly Localizes on the Mitochondria"Mol.Biol.Cell. 14. 3266-3279 (2003)

T.Yoshihisa 等人：“细胞质前 tRNA 剪接的可能性：酵母 tRNA 剪接核酸内切酶主要定位于线粒体”Mol.Biol.Cell。