発作性失調症2型モデルマウスを用いた発症機構の解明と遺伝子治療の試み

使用2型阵发性共济失调小鼠模型阐明发病机制并尝试进行基因治疗

• 批准号: 14017032
• 负责人: 三枝 弘尚
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14017032/
• 关键词: Cav2.1チャネル; 発作性失調症2型; ノックインマウス; 遺伝子治療

本研究ではP/Q型Caチャネルをコードするalpha1A遺伝子の変異に起因する発作性失調症2型(以下EA2)のモデルマウスを作製し、それを用いてEA2発症機序の解明およびその遺伝子治療法の開発を目的とする。昨年度作製したEA2ノックインマウスおよび、その導入遺伝子にさらに改変を加えたマウスを用いて、導入したヒトalpha1Aの脳内における発現を検討した。その結果、導入したヒトalpha1A cDNAの発現量はこの2種類のマウスで10倍程度異なることが判明した。現在、これらのマウスの行動学的解析を現在すすめており、EA2モデルとしての評価を行っている。その一方で、遺伝子治療の一つの方法としてRNA/DNAキメラオリゴヌクレオチド(以下RDOと略)の利用を試みた。現在までに種々の細胞種でいろいろな遺伝子にRDOにより点変異を導入できることが知られているが、神経系細胞でもこの手法が適用できるかは明確ではない。そこで予備的な実験としてマウスの自然発生突然変異系統leaner(laと略、マウスalpha1A遺伝子の中のあるスプライスドナー部分に点変異をもち、alpha1A遺伝子のノックアウトマウスに似た症状を示す)の小脳にポリエチレンイミンを用いてRDOを導入することを試みた。その結果、通常なら3-4週齢で死亡してしまうlaホモ接合体の中に数カ月以上生き延びる個体が観察され、RDOによる遺伝子治療が有効である可能性が示唆された。現在初代培養マウス小脳顆粒細胞にRDOを導入し、実際に遺伝子修復が起きているのか、および、もしそうならどれくらいの頻度でおこるものかをRT-PCRやgenomic DNAに対するPCRにより検討している。

In this study, we studied the cause of Ca

项目成果

Han, W.: "Altered cocaine effects in mice lacking Ca_v2.3 (α_<1E>) calcium channel"Biochem. Biophys. Res. Commun. 299. 299-304 (2002)

Han, W.：“缺乏 Ca_v2.3 (α_<1E>) 钙通道的小鼠中可卡因的作用”Biochem. Res. 299. 299-304 (2002)

Saegusa, H.: "Effects of ablation of N-and R-type Ca^<2+> channels on pain transmission"Neurosci. Res.. 43. 1-7 (2002)

Saegusa, H.：“消融 N 型和 R 型 Ca^2 通道对疼痛传递的影响”Neurosci。

Takei, T.: "Anesthetic sensitivities to propofol and halothane in mice lacking the R-type (Ca_v2.3) Ca^<2+> channel"Anesth. Analg.. (印刷中).

Takei, T.：“缺乏 R 型 (Ca_v2.3) Ca^2+ 通道的小鼠对异丙酚和氟烷的麻醉敏感性”Anesth..（出版中）。