AD病態惹起分子・リポ蛋白非結合型Aβの臨床応用

AD发病分子/非脂蛋白结合Aβ的临床应用

• 批准号: 14017069
• 负责人: 松原 悦朗
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14017069/
• 关键词: アルツハイマー病; Aβ; 血液リポ蛋白非結合型Aβ; トランスジェニックマウス; メラトニン; ELISA; ダウン症候群

本年度の研究実施計画に従い下記の検討を行った。(1)髄液総Aβ40/42およびリポ蛋白非結A型Aβ40/42の測定リポ蛋白非結合型Aβ40/42の作製は600μlのヒト髄液からsequence density floating超遠心法を用いてリポ蛋白分画を除去し、Aβ40/42の測定はELISAで行った。さらに、ゲルろ過法を用いて、高分子量のリポ蛋白結合型と低分子のリポ蛋白非結合型Aβ40/42を分取後、ELISAにて解析した。(2)AD脳、正常加齢脳におけるリポ蛋白結合型と非結合型Aβ40/42の検討6例のAD脳と4例の健常者脳から/トリス緩衝液と70%蟻酸によって可溶性Aβ40/42と不溶性Aβ40/42をそれぞれ抽出した。トリス緩衝液可溶性Aβ40/42からゲルろ過法を用いて、高分子量のリポ蛋白結合型と低分子のリポ蛋白非結合型Aβ40/42を分取後、ELISAとイムノブロットにて解析した。脳内両分子種の存在を確認し、AD脳でAβアミロイド沈着に直接関与する分子種はリポ蛋白非結合型Aβである傍証を得た。(3)健常者、Down症候群、AD患者における血液総コレステロール測定血液中総コレステロール濃度を測定後、総Aβ40/42及びリポ蛋白非結合型Aβ40/42との相関を検証し、AD発症のリスクファクターとなりうるかを検証した。(4)APP過剰発現トランスジェニックマウスにおける総コレステロール測定血液総コレステロール濃度と、脳Aβアミロイド沈着量、脳Aβ40/42プール量、血中Aβ40/42量との相関を検討した。(5)APP過剰発現トランスジェニックマウスのメラトニン治療APPsw miceで4ヶ月齢から15.5ヶ月齢まで0.5mg/mlのメラトニンを飲水にて投与し、脳Aβアミロイド沈着量、脳Aβ40/42プール量、脳nitrotyrosine量、寿命を指標としてメラトニンの治療効果を検討した。

This year's research implementation plan is under review. (1)Aβ 40/42 assay was carried out by ELISA. Aβ 40/42 assay was carried out by ELISA. In addition, the high molecular weight protein binding type and the low molecular weight protein binding type Aβ40/42 were separated and analyzed by ELISA. (2)AD In addition, 6 cases of AD and 4 cases of normal Aβ40/42 were extracted from soluble Aβ40/42 and insoluble A β 40/42 in 70% formic acid buffer. Soluble Aβ 40/42 in buffer solution was analyzed by ELISA after separation of high molecular weight protein binding form and low molecular weight protein non-binding form Aβ40/42 The presence of endogenous Aβ protein was confirmed, and the presence of A β protein was directly related to AD β protein expression. (3)The correlation between A β 40/42 and non-binding Aβ 40/42 protein was detected in healthy individuals, patients with Down syndrome and AD by measuring the concentration of A β40/42 in blood. (4) The correlation between the concentration of total cholesterol in blood, the amount of β-amyloid deposition, the amount of β-amyloid 40/42 and the amount of β-amyloid 40/42 in blood was studied. (5) APPsw rice is 15.5 mg/ml per month, and the treatment effect of APPsw rice is discussed. The treatment effect of APPsw rice is discussed.

项目成果

Matsubara B, et al.: "Vascular Amyloidosis in neurodegerative conditions"Drug News & Perspectives. 15. 439-444 (2002)

Matsubara B 等人：“神经退行性疾病中的血管淀粉样变性”药物新闻

Matsubara E et al.: "Platelet Microparticles as Carriers of Soluble Alzheimer's Amyloid beta (sAβ)."Ann NY Acad Sci. 977. 340-348 (2002)

Matsubara E 等人：“血小板微粒作为可溶性阿尔茨海默病β淀粉样蛋白 (sAβ) 的载体。” Ann NY Acad Sci 977. 340-348 (2002)

Matsubara E, et al.: "Melatonin increases survival and inhibits oxidative and amyloid pathology in a transgenic model of Alzheimer's disease"J Neurochem. (in press). (2003)

Matsubara E 等人：“褪黑素可提高阿尔茨海默病转基因模型的存活率并抑制氧化和淀粉样蛋白病理”J Neurochem。

Shizuka-Ikeda M, Matsubara E, et al.: "Generation of amyloid beta protein from a presenilin-1 and betaAPP complex"Biochem Biophys Res Commun. 292. 571-578 (2002)

Shizuka-Ikeda M、Matsubara E 等人：“从早老素-1 和 betaAPP 复合物生成淀粉样β蛋白”Biochem Biophys Res Commun。

Pappolla MA, Matsubara B, et al.: "Hypercholesterolemia is an early risk factor for the development of Alzheimer amyloid pathology"Neurology. (in press). (2003)

Pappolla MA、Matsubara B 等人：“高胆固醇血症是阿尔茨海默病淀粉样蛋白病理学发展的早期危险因素”神经病学。