世界的大流行をおこしている腸炎ビブリオ新クローンの病原性に関する分子遺伝学的研究

导致全球大流行的副溶血弧菌新克隆致病性的分子遗传学研究

• 批准号: 14021049
• 负责人: 西渕 光昭
• 金额: $ 3.01万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021049/
• 关键词: 世界的大流行; 腸炎ビブリオ; ハイブリダイゼーション

1.腸炎ビブリオVP81株(O3:K6,新型クローン)のゲノムをテスター,U-5474株(O3:K6,新クローンに属さない)のゲノムをドライバーとして,subtractive hybridization法によって,VP81株ゲノムに特異的な塩基配列の候補92種類をクローン化した。クローン化したDNAのそれぞれを^<32>Pで標識してプローブとし、世界各地で分離された種々の菌株の代表菌株(GS-PCR陽性31株、陰性27株)との反応をハイブリダイゼーション法で検査した。その結果、新クローンに特異性のあるクローン2種、部分的に特異性のあるクローン2種が同定できた。塩基配列を解析した結果、特異性のあるクローンは腸炎ビブリオ以外の種々の細菌種と部分的に相同性のあるモザイク様配列から成っていた。現在、クローン化した新クローンに特異性のある塩基配列の周辺部塩基配列をwalking法によって解析しており、どのような遺伝子が含まれ、どのような機能を果たしているかを明らかにする予定である。2.新クローンの耐熱性溶血毒(TDH)の産性量については、すでに蛋白レベルで調べたが、今回遺伝子の転写レベルを確認した。TRC法を適用して新しく開発した方法によってtdh遺伝子特異的mRNAを定量することが可能になったので、この方法で調べたところ新クローンと従来の神奈川現象陽性株とで転写レベルに特に大きな差はなかった。3.バングラデシュにおける共同研究において、tdh遺伝子陽性菌株(多くは新クローンに属する)に感染した患者において、TDHに対して強い特異的な免疫反がおこっていることを明らかにした。

1. VP81 strain (O3:K6, a new type of virus) and O3:K6 strain (O3:K6, a new strain of the genus) were isolated and sequenced. The phenotypic characteristics of these strains were analyzed by subtractive hybridization method, and the phenotype of VP81 strain was classified as phenotype 92.

项目成果

Qadri, F. et al.: "Adaptive and inflammatory immune responses in patients infected with strains of Vibrio parahaemolyticus"J. Infect. Dis.. 187. 1085-1096 (2003)

Qadri, F. 等人：“副溶血弧菌菌株感染患者的适应性和炎症免疫反应”J.

Ishiguro, T. et al.: "Intercalation activating fluorescence DNA probe and its application to homogenous quantification of a target sequence by isothermal sequence amplification in a closed vessel"Anal. Biochem.. (In press). (2003)

Ishiguro, T. 等人：“嵌入激活荧光 DNA 探针及其在封闭容器中通过等温序列扩增对目标序列进行均质定量的应用”。

Okuda, J. et al.: "The toxR gene of Vibrio anguillarum : not a virulence regulator but a good tool for diagnosis"Fisheries Science. 68(Suppl.). 1109-1112 (2002)

Okuda, J. 等人：“鳗弧菌的 toxR 基因：不是毒力调节剂，而是诊断的良好工具”《渔业科学》。