ΔNp73によるp73およびp53の負の分子制御機構

ΔNp73对p73和p53的负向分子调控机制

• 批准号: 14026061
• 负责人: 中川原 章
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Chiba Cancer Center (Research Institute)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14026061/
• 关键词: p73; MM1; c-Myc; E2F1; p53; MDM2; HMGB1; HMGB2

1.c-Mycによるp73機能の抑制機構に関する解析:p73αのCOOH端領域をバイトとして酵母two-hybrid法による結合蛋白質の探索を行ったところ、核内c-Myc結合蛋白質であるMM1が同定され、免疫沈降法によりMM1とp73αは物理的に結合した。MM1はp73によるBaxおよびPG13のレポーター活性を特異的に増強した。また、MM1はp73による細胞増殖抑制作用も増強した。一方、c-Mycはp73αとも免疫沈降することが分かり、これら3者は複合体を形成しているものと考えられた。c-Mycはp73の機能を抑制したが、その抑制はMM1によって解除された。したがって、p53が関与しないp73とc-Myc、MM1の相互制御機構が存在することが明らかとなった。2.E2F1によるp73の制御機構に関する解析:我々は、E2F1とp73が免疫沈降法により共沈することを見出した。E2F1はp73の安定性や機能に大きな影響を及ぼしている可能性が示唆されたため、現在詳細な解析を進めている。3.p73の特異的ユビキチンリガーゼの探索:MDM2に相当するp73 E3ユビキチンリガーゼの検索を行った。その結果、新規HECT型E3ユビキチンリガ-ゼがp73に結合しp73をユビキチン化することを見い出したが、p73蛋白質の分解は起こらなかった。そこで、p73の転写活性化ドメインに結合するE3ユビキチンリガーゼが存在するものと考え、CytoTrap法による結合蛋白質の同定を試みている。4.抗癌剤耐性獲得におけるp73の役割に関する研究:核内蛋白質HMGB1,HMGB2がp53のみならずp73とも結合することを見い出した。HMGBはp73の複合体形成ドメインに結合し、p73のDNA結合能を促進するとともに、その転写活性化能も亢進させた。

1. Analysis of the mechanism of inhibition of c-Myc function:p73α COOH domain, yeast two-hybrid method, exploration of binding protein, nuclear c-Myc binding protein identification, immunoprecipitation method, MM1 and p73α physical binding. MM1: Bax and PG13: Specific increase in activity MM1 has a strong inhibitory effect on cell proliferation. A party, c-Myc, p73, α, c-Myc p73 function is suppressed, and MM1 function is suppressed. P53, p73, c-Myc, MM1, and other control mechanisms exist. 2. E2F1 and p73 control mechanism analysis: I, E2F1 and p73 immune sedimentation method E2F1 p73 stability and function of the large impact and the possibility of a detailed analysis 3.p73 's special search:MDM2 is equivalent to p73 E3 's search. As a result, the new HECT type E3 protein binding to the p73 protein was detected. The identification of binding proteins by CytoTrap method was studied. 4. Study on p73 binding in anti-cancer resistance acquisition: Nuclear proteins HMGB1, HMGB2 and p53 binding HMGB promotes p73 complex formation, DNA binding, and activation.

项目成果

Stros M, Ozaki T, Nakagawara A, et al.: "HNGB1 and HMGB2 cell-specifically down-regulate the p53-and p73-dependent sequence-specific transactivation from the human Bax gene promoter"J.Biol.Chem.. 277. 7157-7164 (2002)

Stros M、Ozaki T、Nakakawara A 等人：“HNGB1 和 HMGB2 细胞特异性下调人 Bax 基因启动子的 p53 和 p73 依赖性序列特异性反式激活”J.Biol.Chem.. 277。

Ichimiya S, Kojima T, Nakagawara A, et al.: "p73 is expressed in human thymic epithelial cells"J.Histochem.Cytochem.. 50. 155-462 (2002)

Ichimiya S、Kojima T、Nakakawara A 等：“p73 在人胸腺上皮细胞中表达”J.Histochem.Cytochem.. 50. 155-462 (2002)

Shinbo J, Ozaki T, Nakagawara A, et al.: "p73-dependent expression of DAN during cisplatin-induced cell death and osteoblast differentiation"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 295. 501-507 (2002)

Shinbo J、Ozaki T、Nakakawara A 等：“顺铂诱导的细胞死亡和成骨细胞分化过程中 DAN 的 p73 依赖性表达”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 295. 501-507 (2002)

Saito-Ohara F, Imotol, Nakagawara A, et al.: "PPM1D is a potential target for 17q gain in neuroblastoma"Cancer Res.. (in press).

Saito-Ohara F、Imotol、Nakakawara A 等人：“PPM1D 是神经母细胞瘤 17q 增益的潜在靶标”Cancer Res..（正在出版）。

Nakagawa T, Takahashi M, Nakagawara A, et al.: "Physical interaction of p73 with c-myc and MM1, a c-myc-binding protein, and modulation of the p73 function"Mol.Cell.Biol.. 22. 2575-2585 (2002)

Nakakawa T、Takahashi M、Nakakawara A 等人：“p73 与 c-myc 和 MM1（一种 c-myc 结合蛋白）的物理相互作用，以及 p73 功能的调节”Mol.Cell.Biol.. 22. 2575