ストレス応答における核内チオレドキシンによるmRNA核外輸送のredox制御機構

应激反应中核硫氧还蛋白mRNA核输出的氧化还原控制机制

• 批准号: 14035229
• 负责人: 井沢 真吾
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14035229/
• 关键词: チオレドキシン; mRNA; Saccharomyces cerevisiae; 核外輸送; レドックス制御; ストレス; エタノール

出芽酵母Saccharomyces cerevisiaeを用いて、ストレス条件下におけるmRNA核外輸送の制御機構について解析を行った。エタノールストレス条件下やチオレドキシン欠損株trx1Δtrx2Δにおける酸化的ストレス条件下でのmRNAの局在を、oligo dT probeを用いたin situ hybridizationで観察したところヒートショックストレスと同様に大部分のmRNAは核外輸送が阻害され核内への蓄積が観察された。その一方で、ヒートショックプロテインをコードするSSA4遺伝子のmRNAは優先的に核外輸送されることが確認された。また、mRNA核外輸送因子の細胞内局在についてGFP融合タンパク質を用いて観察した。エタノールストレス条件下ではGle1やGle2については核膜上から細胞質側に移動することや、Mex67などは核膜内に拡散することが確認された。また、同じ出芽酵母Saccharomyces cerevisiaeでも実験室酵母と清酒醸造用の協会酵母では、mRNA核外輸送抑制が開始されるエタノール濃度に顕著な違いが観察された。各種の酵母について検討した結果、エタノール耐性とmRNA核外輸送制御との密接な相関が観察された。さらに、エタノールによるmRNA核外輸送抑制が核膜の流動性に起因している可能性を見い出した。膜脂質の組成や流動性を変化させる各種の条件下では、エタノールによるmRNA核外輸送抑制を改善することを確認した。マイクロアレイ解析とプロテオーム解析を組み合わせて、エタノール条件下で優先的に核外輸送されるmRNAの同定を進行中である。

Saccharomyces cerevisiae Saccharomyces cerevisiae was used under the condition of low temperature and low temperature, and the mRNA was sent to the control agency for analysis. Under the condition that the strain trx1 Δ trx2 delta is not available under the condition of acidification, the mRNA bureau is under the condition of acidification. The oligo dT probe uses the in situ hybridization to observe the temperature, the temperature, the temperature One party, the other, the other. The extra-nuclear delivery factors of mRNA and GFP fusion were detected in vivo. Under different conditions, Gle1