ストレス条件下および酒類醸造過程における酵母mRNAの選択的核外輸送機構の解析

应激条件下及酒精饮料酿造过程中酵母mRNA选择性出核机制分析

• 批准号: 18780054
• 负责人: 井沢 真吾
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18780054/
• 关键词: P-body; エタノールストレス; mRNA核外輸送; 酵毋; アルコール発酵; 清酒醸造; ストレス; エタノール; HSP; ポリA鎖; 出芽酵母

Processing body (P-body)はヌクレアーゼによるmRNA分解の場として同定されたが、近年、ストレス応答における役割が注目されている。出芽酵母ではグルコース枯渇や高浸透圧ストレス条件下、あるいは翻訳開始の阻害によってP-bodyの形成が促進される。これらのストレス条件下では非翻訳下にあるmRNAがポリソームからP-bodyに隔離され、翻訳の一時的抑制がおこなわれる。逆に、細胞がストレス条件下から脱するとP-body内のmRNAはポリソームへと戻り翻訳が再開される。そのため、P-bodyはストレス条件下における細胞質でのmRNA代謝に深く関与していると考えられている。そこで、エタノールストレス条件下におけるP-body形成を検討したところ、実験室株と清酒酵母株のいずれにおいても、5-10%のエタノールを含むSD培地中でP-bodyの形成が促進された。また、培地中のエタノールを除くことによりP-bodyの速やかな分解が観察されたことから、エタノールストレスによってもP-bodyの形成が促進されることを確認した。次に、白ワイン醸造および清酒小仕込み試験を行い、実際の酒類醸造過程でのP-body形成を検討した。その結果、白ワイン醸造過程ではエタノール濃度依存的にP-bodyの形成が促進されたが、マスト中の糖度低下の影響は確認されなかった。一方、清酒醸造過程ではエタノール濃度依存的なP-body形成は起きず、同濃度のエタノールを含むSD培地やワインマスト中とは異なる挙動を示した。このことから、マスト中と清酒もろみ中では細胞質における翻訳効率やmRNA fluxが異なると考えられた。

Processing body (P - body) は ヌ ク レ ア ー ゼ に よ る mRNA decomposition の field と し て with fixed さ れ た が, in recent years, ス ト レ ス 応 answer に お け cut が る service attention さ れ て い る. Budding yeast で は グ ル コ ー ス withered 渇 や high saturate 圧 ス ト レ ス conditions, あ る い は 訳 start の resistance against に よ っ て P - body の form が promote さ れ る. こ れ ら の ス ト レ ス conditions で は under non turn 訳 に あ る mRNA が ポ リ ソ ー ム か ら P - body に isolation さ れ, double 訳 の a temporary suppression が お こ な わ れ る. Inverse に, cell が ス ト レ ス conditions か ら す off る と P - the body の mRNA は ポ リ ソ ー ム へ と 戻 り turn 訳 が to open さ れ る. そ の た め, P - body は ス ト レ ス conditions に お け る cytoplasm で の mRNA metabolic に deep く masato and し て い る と exam え ら れ て い る. そ こ で, エ タ ノ ー ル ス ト レ ス conditions に お け る P - body form を beg し 検 た と こ ろ, be 験 chamber strains と wine yeast strains の い ず れ に お い て も, 5-10% の エ タ ノ ー ル を containing an む SD petty で P - body の form が promote さ れ た. ま た, cultivated land in の エ タ ノ ー ル を except く こ と に よ り P - body の speed や か な decomposition が 観 examine さ れ た こ と か ら, エ タ ノ ー ル ス ト レ ス に よ っ て も P - body の form が promote さ れ る こ と を confirm し た. Time に, white ワ イ ン 醸 made お よ び wine little serving 込 み test line を い, the event be の alcohol 醸 procedure で の P - body form を beg し 検 た. そ の results, white ワ イ ン 醸 procedure で は エ タ ノ ー ル concentration dependent に P - body の form が promote さ れ た が, マ ス ト の in low sugar の influence は confirm さ れ な か っ た. Side, sake 醸 procedure で は エ タ ノ ー ル concentration dependent な P - body formation は き ず, with concentration の エ タ ノ ー ル を containing む SD petty や ワ イ ン マ ス ト in と は different な る 挙 dynamic を shown し た. こ の こ と か ら, マ ス ト と in wine も ろ み in で は cytoplasm に お け る turn 訳 sharper rate や mRNA flux が different な る と exam え ら れ た.

项目成果

Efficient extraction of thioreodoxin from Saccharomyces cerevisiae with ethanol.

用乙醇从酿酒酵母中高效提取硫氧还蛋白。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Appl. Environ. Microbiol 73
• 作者: Y. Inoue;W. Nomura;Y. Takeuchi;T. Ohdate;S. Tamasu,
• 通讯作者: S. Tamasu,

Release of thioredoxin from Saccharcmyces cerevisiae with environmental stimuli : solubilization of thioredoxin with ethanol.

环境刺激下酿酒酵母释放硫氧还蛋白：用乙醇溶解硫氧还蛋白。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Appl.Microbiol.Biotechnol. (in press)
• 作者: S. Izawa;T. Kita;K. Ikeda;T. Miki and Y. Inoue;Y.Takeuchi et al.
• 通讯作者: Y.Takeuchi et al.

Formation of cytoplasmic P-bodies in sake yeast during Japanese sake brewing and wine making

• DOI: 10.1271/bbb.70417
• 发表时间: 2007-11-01
• 期刊: BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 1.6
• 作者: Izawa, Shingo;Kita, Takeorni;Inoue, Yoshiharu
• 通讯作者: Inoue, Yoshiharu

酵母のストレス応答におけるmRNA代謝機構に関する研究

酵母应激反应中mRNA代谢机制研究

• 发表时间: 2008
• 作者: S.Izawa;K.Ikeda;T.Kita;Y.Inoue;井沢真吾
• 通讯作者: 井沢真吾

酒類醸造における酵母のアルコール耐性と応答、「発酵・醸造食品の最新技術と機能性」

酒精饮料酿造中酵母的酒精耐受性和反应，“发酵和酿造食品的最新技术和功能”

• 发表时间: 2006
• 作者: 井沢真吾;井上善晴
• 通讯作者: 井上善晴