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組換えイネによる内分泌攪乱作用のあるフェノール系化合物の分解

利用重组水稻降解具有内分泌干扰作用的酚类化合物

基本信息

批准号：
14042228
负责人：
大宮邦雄
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では有機塩素系化合物や農薬などフェノール系(芳香族系)化合物で汚染された土地を植物の力で浄化する技術の開発をめざした。具体的には、内分泌攪乱物質と考えられている多環芳香族を無毒化できる真菌類のパーオキシダーゼ系を発現させた組換えイネの育種をめざした。白色不朽菌のラッカーゼ、マンガンパーオキシダーゼは様々な汚染物質をラジカル反応によって分解あるいは重合化して無毒化することが知られている。そこで、カワラタケのラッカーゼ、マンガンパーオキシダーゼ遺伝子を、イネで高発現する改良型CaMV35Sプロモーターの下流にこれらの遺伝子をそれぞれつないでアグロバクテリウム法でイネ培養細胞に導入し、形質転換カルスを選抜した。このカルスを再分化培地に移してイネ植物体への再分化をおこなったが、カルスから植物体を再分化させる過程で組換えイネは枯死したことから、これらの発現はイネに毒性があることが示唆された。一方、塩素化多環芳香族の微生物分解過程で生じるクロロベンゾエートを分解する土壌細菌より、これらの分解系遺伝子のうち、クロロカテコールジオキシゲナーゼ遺伝子cbnAとクロロムコネートシクロイソメラーゼ遺伝子cbnBをイネに導入し、cbnA-cbnB両遺伝子をもつ形質転換イネを5系統得ることができた。両遺伝子の導入はPCR法で確認でき、さらにウエスタンブロッティングでcbnA,cbnBの発現を確認できた。クロロカテコール溶液に形質転換カルスを入れたところ、クロロカテコールが分解された。

This study explores the use of organic compounds and organic compounds (aromatic compounds) to pollute the soil and the power of plants to purify the soil, and to develop technologies for purifying the soil. Specific substances, endocrine disrupting substances, polycyclic aromatic substances, non-toxic substances, etc. The fungus type のパーオキシダーゼ is a を発成させた group replacement えイネのbreeding をめざした. White immortal bacteriaのラッカーゼ、マンガンパーオキシダーゼは様々なpollution substanceをラThe decomposition of ジカルによってあるいは overlap and the non-toxic transformation することが知られている.そこで、カワラタケのラッカーゼ、マンガンパーオキシダーゼImproved CaMV35S プロモーターのdegradation The Japanese method is used to introduce cultured cells and change the shape and quality of cells. Redifferentiation of the plant body, redifferentiation of the plant bodyさせる process で group replacement えイネは withered したことから, これらの発appears はイネにtoxicity があることがshows 唆された. On the one hand, the microbial decomposition process of polycyclic aromatic polycyclic aromatics is a biodegradation process. Soil bacteria より, これらのdegradation system のうち, クロロカテコールジオキシゲナーゼDirected by cbnAとクロロムコネートシクロイソメラーゼ弝子cbnBをイネにEnter し, cbnA-cbnB両伝子をもつmorphological material change イネを5 system gets ることができた.両伝子の introduced into the PCR method has been confirmed, and the PCR method has been confirmed. The クロロカテコール solution is changed into カルスを into れたところ, クロロカテコールが decomposition された.