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ゲノム再プログラム化を支配するゲノムワイドな遺伝子発現調節機構の解析

控制基因组重编程的全基因组基因表达调控机制分析

基本信息

批准号：
16011267
负责人：
三瀬名丹
金额：
$ 2.43万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

始原生殖細胞(PGC)におけるゲノム再プログラム化に伴う遺伝子発現変化を調べるために、PGCで特異的に発現するOct4プロモータによりPGCでGFPを発現するTgマウスを用い、11、12、13日目の3ステージの胚から、PGCを回収、マイクロアレイ解析を行った。マイクロアレイの解析にはES細胞を比較の対象として用い、ES細胞を分化させることで得られたPGC様細胞や、雌雄のPGCから樹立された胚性生殖細胞(EG)細胞、さらに精原細胞由来の幹細胞であるGS細胞も用い、複数の幹細胞と、PGCの遺伝子発現レベルでの比較を行った。雄EG細胞は雄ES細胞と非常によく似た遺伝子発現プロファイルを示し、その由来となったPGCとは大きく違っていることが分かり、EG細胞の樹立の過程において大規模な遺伝子発現の変化が起きていることを明らかにした。一方、PGC様細胞はちょうどEG細胞と胚由来のPGCとの中間的な遺伝子発現を示し、ES細胞の状態から細胞分化によりPGCの形質に近い状態に変化していることが分かった。また、GS細胞はPGCに比較的似た遺伝子発現パターンを示した。マイクロアレイの結果を自己組織化マッピング(SOM)法によってクラスタリング解析を行い、それぞれの細胞を特徴づける遺伝子クラスタを同定出来た。一方、X染色体不活性化および再活性化はタンパク質をコードしないXist RNAにより支配されており、配列特異的RNA結合タンパク質MS2を用いてXist RNAの可視化を目指している。X染色体再活性化は最も端的なゲノム再プログラム化の例であり、上のマイクロアレイ解析の結果とあわせることによりPGCでのゲノム再プログラム化を担う遺伝子群の同定ができる。これまでに、X染色体不活性化中心全長を含むBAC上のXist遺伝子にMS2認識配列を導入する改変に成功し、ノックインマウス作製の準備がととのった。

The primordial reproductive cells (PGC) were reactivated with the parasitoid, and the PGC was characterized by Oct4, PGC, GFP, Tg, PGC, PGC, and so on. The ES cells were analyzed and compared. The PGC cells were obtained by differentiation of the ES cells, the embryonic reproductive cells (EG) by the PGC cells, the spermatogonia from the spermatogonia, the GS cells by the plural cells, the cells by the PGC cells. The male EG cell, the male ES cell, the male ES cell, On the one hand, the origin of the PGC cell, the EG cell, the PGC cell, the ES cell, the PGC cell, the cell. The children who are similar to each other in the comparison of GS and GS cells are shown to show that they are different. The results show that you can use the SOM method to analyze the characteristics of the system, and to make sure that you have the same information. On one side, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of the X chromosome, the inactivation of the X chromosome, the reactivation of Reactivation of the X chromosome in the most innermost part of the disease, the results of the analysis of the results show that the subgroup of the subgroup is the same as that of the subgroup. The results of the analysis of the results show that the subgroup of the subgroup is the same as that of the subgroup of PGC. The full length of the center for X chromosome inactivation and Xist chromosome inactivation on BAC contains the following information: enter the registration file into the database to change it successfully, and prepare to register for registration.