筋ジストロフィー症の新規治療法としての霊長類胚性幹細胞由来筋細胞の移植応用

灵长类胚胎干细胞来源的肌肉细胞移植作为肌营养不良症新疗法的应用

基本信息

  • 批准号:
    20659238
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.05万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 财政年份:
    2008
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2008 至 2009
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

デュシェンヌ型筋ジストロフィー症は呼吸筋・骨格筋の障害をもたらし患者のQOLは低下し且つ生命予後も不良である。我々はこれら筋疾患に対する根治療法として幹細胞から筋細胞を分化誘導し、これを用いた移植治療の研究を行なっている。筋ジストロフィー症モデルであるmdxマウスの筋細胞は異常ジストロフィン遺伝子のためジストロフィン蛋白を持たないが、ES細胞由来筋細胞と融合して正常にジストロフィン蛋白を発現する筋線維を形成した。近年、ES細胞の持つ倫理的制約を回避できる誘導多能性幹細胞(iPS)細胞が樹立された。そこでiPS細胞にも同様に遺伝子導入で筋細胞を分化誘導可能であるかを検討した。より強いIGFII産生をもたらすため、CAG promoterの下流にIGFII遺伝子をサブクローニングしたpCAG-IGFIIを作成した。電気穿孔法にて上記プラスミドをiPS細胞に導入しG418耐性の安定した形質転換細胞(IGFII遺伝子を導入した細胞;IGFII細胞)を回収した。しかしこの細胞は過剰な細胞増殖を行い、腫瘍形成能を示したため、その後の検討は中止した。そこでiPS細胞を遺伝子組み換え可溶性IGFIIと共に21日間培養して筋細胞分化を誘導した。この細胞はIGFII受容体、骨格筋特異的蛋白であるMyoD、myogenin、MRF4、myf5、dystrophin mRNAを発現し、dystrophin蛋白も発現した。この成績はiPS細胞をIGFIIとともに培養することで、腫瘍化していない筋細胞を分化誘導できることを示している。今後、mdxマウスへのiPS細胞由来筋細胞の移植も行いその有用性を評価する。
The patient's QOL is low and the patient's life is poor. We are conducting research on radical therapy for tendon diseases, induction of differentiation of stem cells, and transplantation therapy. Tendon cells are abnormal, and ES cells are normal. In recent years, ES cell ethical constraints have been avoided and induced pluripotent stem cells (iPS) have been established. In addition, iPS cells can be induced to differentiate into muscle cells by gene transfer. IGFII is produced by CAG promoter and downstream IGFII gene. The electroporation method was used to record the introduction of iPS cells into stable, morphologically altered cells (IGFII cells). Cell proliferation, tumor formation, and tumor management The iPS cells were cultured for 21 days and induced to differentiate into soluble IGFIs. The expression of IGFII receptor and muscle-specific proteins in these cells is mainly due to myoD, myogenin, MRF4, myf5 and dystrophin mRNA. The results showed that iPS cells could be cultured and differentiated. In the future, the usefulness of iPS cells derived from tendon cells in transplantation will be evaluated.

项目成果

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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    加藤由理子;(他5名)
  • 通讯作者:
    (他5名)
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Atsushi Fujii;S. Chiba;E. Takada;Yuji Ueda;J. Shimizu;M. Beppu;N. Suzuki
  • 通讯作者:
    Atsushi Fujii;S. Chiba;E. Takada;Yuji Ueda;J. Shimizu;M. Beppu;N. Suzuki
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