ゲノム規模で単離した分裂酵母の胞子形成必須遺伝子産物の時間・空間配置の解析

在全基因组范围内分离的裂殖酵母中孢子形成必需基因产物的时间和空间排列分析

• 批准号: 14014246
• 负责人: 下田 親
• 金额: $ 3.97万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014246/
• 关键词: 減数分裂; 胞子形成; ゲノム規模; 分裂酵母; 細胞内局在; カルシウムホメオスタシス; 前胞子膜

分裂酵母の胞子形成に必須の機能を持つ遺伝子をゲノム全体からスクリーニングするプロジェクトを推進した。本年度は主として次の3つのアプローチにより多数の新規遺伝子を見い出すことに成功し、一部その機能を詳細に検討した。1)胞子形成関連遺伝子のスクリーニングと単離a)局在を指標にした胞子形成関連タンパク質の同定:GFP融合cDNAライブラリー(胞子形成特異的mRNAより作成)を形質転換し、特定の細胞構造に局在するクローンを単離した。これらのスクリーニングによりスピンドル極体、スピンドル、胞子表層に局在するものなど、減数分裂と胞子形成に関与すると予想されるものが得られた。b)栄養増殖と胞子形成に必須のsev遺伝子群の組織的検索:同定された遺伝子のうち、sev1/cdt2がDNA複製に必須の機能を持つことを証明した。また、sev4遺伝子がカルシウム輸送ATPaseをコードすることを示した。カルシウムホメオスタシスが胞子形成に重要であることを初めて示すことができた。c)胞子形成と減数分裂の時間的連関が乱れた変異株の解析から4個の遺伝子を同定し、これらが減数分裂時の分裂装置に関連したものであることを明らかにした。2)胞子形成関連タンパク質の時間空間分布の解析上記の細胞内局在タンパク質スクリーニングで見いだされた約1700種のタンパク質について、一部胞子形成過程での局在場所を決定した。また、Sev1タンパク質は減数分裂前DNA複製期に顕著に増加すること、核と細胞質をシャトリングすることを明らかにした。Sev4タンパク質は小胞体に局在することを見いだした。

Split yeast の spore formed の function を に obligatory つ heritage 伝 son を ゲ ノ ム all か ら ス ク リ ー ニ ン グ す る プ ロ ジ ェ ク ト を propulsion し た. This year は main と し て の 3 つ の ア プ ロ ー チ に よ り most の new rules but see son 伝 を い す こ と に し success, a そ の function を detailed に beg し 検 た. 1) spore formed masato even heritage 伝 son の ス ク リ ー ニ ン グ と 単 bureau in を indicators from a) に し た spore formed masato even タ ン パ ク qualitative の with: GFP fusion cDNA ラ イ ブ ラ リ ー (spore forming specific mRNA よ り made を form quality planning in し, specific の に cellular structure in す る ク ロ ー ン を 単 from し た. こ れ ら の ス ク リ ー ニ ン グ に よ り ス ピ ン ド ル polar body, ス ピ ン ド ル, spore surface に bureau in す る も の な ど, meiosis と spore formed に masato and す る と to think さ れ る も の が must ら れ た. B) tech students.their ownship have raised colonization と spore formed に must の sev heritage 伝 subgroup の organization 検 suo: be さ れ た posthumous son 伝 の う ち, sev1 / cdt2 が DNA replication の function を に obligatory つ こ と を prove し た. Youdaoplaceholder0 and sev4 relics 伝 offspring がカ シウム シウム transport ATPaseをコ ドする ドする ドする とを とを とを to た た. カ ル シ ウ ム ホ メ オ ス タ シ ス が spore formed に important で あ る こ と を early め て in す こ と が で き た. C) spore formed の と meiosis time even masato が disorderly れ た - different strains の parsing か ら four の heritage 伝 son を with し, こ れ ら が meiosis の splitting device に masato even し た も の で あ る こ と を Ming ら か に し た. 2) spore formed masato even タ ン パ ク の time the space distribution of の parsing written の cells inside bureau in タ ン パ ク qualitative ス ク リ ー ニ ン グ で see い だ さ れ た about 1700 kinds of の タ ン パ ク qualitative に つ い て formation, a spore で の bureau decided in place を し た. ま た, Sev1 タ ン パ ク DNA replication period before the mass は meiosis に 顕 with に raised す る こ と, nuclear と cytoplasm を シ ャ ト リ ン グ す る こ と を Ming ら か に し た. Sev4タ パ パ the <s:1> plasmic <s:1> small cell に can be found in する だ とを た た.

项目成果

Yoshida, S.: "The Schizosaccharomyces pombe cdt2^+ gene, a target of G1-S phase-specific transcription factor complex DSC1, is required for mitotic and premeiotic DNA replication"Genetics. (in press). (2003)

Yoshida, S.：“粟酒裂殖酵母 cdt2^ 基因是 G1-S 期特异性转录因子复合物 DSC1 的靶标，是有丝分裂和减数分裂前 DNA 复制所必需的”遗传学。

Onishi, M.: "Role of phosphatidylinositol 3-phosphate in formation of forespore membrane in Schizosaccharomyces pombe"Yeast. 20(1). 193-206 (2003)

Onishi, M.：“磷脂酰肌醇 3-磷酸在粟酒裂殖酵母前孢子膜形成中的作用”酵母。

Nakamura-Kubo, M.: "The fission yeast spo14^+ gene encoding a functional homologue of budding yeast Sec12 is required for the development of forespore membranes"Mol.Biol.Cell. 14(in press). (2003)

Nakamura-Kubo, M.：“裂殖酵母 spo14^ 基因编码出芽酵母 Sec12 的功能同源物，是前孢子膜发育所必需的”Mol.Biol.Cell。

中瀬由起子: "酵母の胞子形成研究の現状-細胞膜構築の原理解明をめざして"実験医学(臨時増刊). 21(5). 676-680 (2003)

Yukiko Nakase：“酵母孢子形成研究的现状 - 旨在阐明细胞膜构建的原理”实验医学（特刊）21（5）（2003）。