細胞膜コレステロールに依存するウイルス侵入機構の動態解析
依赖于细胞膜胆固醇的病毒侵入机制的动态分析
基本信息
- 批准号:16017300
- 负责人:
- 金额:$ 4.48万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2004
- 资助国家:日本
- 起止时间:2004 至 2005
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
ラフト,カべオラは,コレステロール/スフィンゴ脂質に富み,細胞内シグナル伝達との関連性が着目されている膜ドメインである.我々は,ウイルス侵入に利用され得るカべオラエンドサイトーシスに関して解析を行っている.その中で,カべオラはヒトコロナウイルス-229E (HCoV-229E)の細胞内侵入に利用される可能性を見出し,これまで報告してきた.今年度は,HCoV-229Eがカべオラから細胞内に侵入する際のエンべロープ膜,カべオラ膜の動態をとらえるため,凍結超薄切片を作製し,免疫電顕法にて,細胞内侵入過程の詳細な検討を行った.まず,エンべロープ膜を追跡するため,HCoV-229Eのエンべロープを認識する抗体が必要とされた.そこでS-proteinに対する抗体を作製した.抗N-protein抗体とともに,作製した抗S-protein抗体も用いて免疫電顕解析を行った.HCoV-229E結合後,3-4時間培養した細胞を固定し解析を行ったところ,細胞表面においては,1)複数のカべオラが集合し,ウイルスを取り込むような像,2)エンべロープ膜とカべオラ膜が癒合した像が認められた.次に,細胞内においては,1)単一のカべオラ小胞に取り込まれたヌクレオカプシド像,2)複数のカべオラ小胞の癒合した膜に取り込まれたヌクレオカプシド像,3)脱殻して膜がなくなったヌクレオカプシド像が認められた.以上のことから,HCoV-229Eは,細胞内侵入の際1)複数のカべオラが集まり,エンべロープとカべオラ膜の膜癒合が起こり,2)カべオラエンドサイトーシスにより細胞内に取り込まれ,3)複数のカべオラが集まって形成されたカべオソームに移動し,やがて脱核する経路を経る可能性が考えられる.
The relationship between lipid rich and intracellular lipid rich is closely related to the membrane. I want to know how to resolve the problem of intrusion. The possibility of intracellular invasion of HCoV-229E (HCoV-229E) by HCoV-229E is reported. This year,HCoV-229E was used to investigate the intracellular invasion process in detail by immunoelectrochemistry. HCoV-229E is the most important component of HCoV-229. The S-protein antibody was produced. Anti-N-protein antibody was prepared and analyzed by immunoelectrochromatography. After binding with HCoV-229E, cells were cultured for 3 -4 days and fixed for analysis. Cell surface was analyzed by immunoelectrochromatography. 1) A plurality of samples were collected and analyzed. 2) A membrane was collected and analyzed. In addition, the intracellular cells are divided into two groups: 1) single cell, 2) multiple cell, and 3) multiple membrane. HCoV-229E is a new type of HCoV-229E. It is proposed that HCoV-229E may be involved in 1) the formation of multiple cell clusters, 2) the formation of multiple cell clusters, 3) the formation of multiple cell clusters, 4) the formation of multiple cell clusters, and 5) the initiation of membrane healing.
项目成果
期刊论文数量(9)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Anti-calreticulin Antibody Binds to a Membrane Protein in Caveolae
- DOI:10.1267/ahc.38.43
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:2.4
- 作者:R. Nomura;T. Aoki;H. Hagiwara;T. Senda;T. Fujimoto
- 通讯作者:R. Nomura;T. Aoki;H. Hagiwara;T. Senda;T. Fujimoto
カペオラエンドサイトーシスとウイルス侵入
Capeola内吞作用和病毒入侵
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Yutaka Enomoto;et al.;野村 隆士;野村 隆士
- 通讯作者:野村 隆士
Neurotropism of swine haemagglutinating encephalomyelitis virus (coronavirus) in mice depending upon host age and route of infection.
- DOI:10.1016/s0021-9975(03)00083-5
- 发表时间:2004-01
- 期刊:
- 影响因子:0.8
- 作者:Hirano N;Nomura R;Tawara T;Tohyama K
- 通讯作者:Tohyama K
Human coronavirus 229E binds to CD13 in rafts and enters the cell through caveolae
- DOI:10.1128/jvi.78.16.8701-8708.2004
- 发表时间:2004-08-01
- 期刊:
- 影响因子:5.4
- 作者:Nomura, R;Kiyota, A;Fujimoto, T
- 通讯作者:Fujimoto, T
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APC(adenomatouspolyposis coli)は後シナプスへのPSD-95とAMPA受容体のクラスタリングを促進する
APC(腺瘤性结肠息肉病)促进 PSD-95 和 AMPA 受体聚集到突触后
- DOI:
- 发表时间:
2007 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
Nobutake Takamori;et. al.;野村 隆士;千田 隆夫;下村 敦司 - 通讯作者:
下村 敦司
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- 发表时间:
2008 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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- DOI:
- 发表时间:
2006 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
Nobutake Takamori;et. al.;野村 隆士;千田 隆夫;下村 敦司;尾之内 高慶;千田 隆夫;野村 隆士;一瀬 千穂(鷲見 千穂) - 通讯作者:
一瀬 千穂(鷲見 千穂)
Genetic rescue of 6-pyruvoyltetrahydropterin synthase knockout mice.
6-丙酮酰四氢蝶呤合酶敲除小鼠的基因拯救。
- DOI:
- 发表时间:
2006 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
Nobutake Takamori;et. al.;野村 隆士;千田 隆夫;下村 敦司;尾之内 高慶;千田 隆夫;野村 隆士;一瀬 千穂(鷲見 千穂);千田 隆夫;Chiho Sumi-Ichinose et. al - 通讯作者:
Chiho Sumi-Ichinose et. al
APC蛋白質のC末端は腸絨毛の構造と機能に関与する
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- DOI:
- 发表时间:
2007 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
Nobutake Takamori;et. al.;野村 隆士;千田 隆夫;下村 敦司;尾之内 高慶 - 通讯作者:
尾之内 高慶
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$ 4.48万 - 项目类别:
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