NF-κB活性化シグナルにおけるp65リン酸化の果たす役割

p65 磷酸化在 NF-κB 激活信号中的作用

• 批准号: 16022224
• 负责人: 櫻井 宏明
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022224/
• 关键词: NF-κB; p65; IKK; Ser-536; SerpinE2; TAK1

NF-κB p65サブユニットSer-536のリン酸化の生理機能解析を、p65欠損MEFに野生型およびS536A変異体を再構築した細胞を用いて行った。その結果、S536A細胞においても正常に核移行およびDNA結合が認められ、リン酸化はp65の核移行やプロモーター領域への結合には影響しないことが明らかとなった。そこで、リン酸化の遺伝子発現に対する影響を調べるために、両細胞を用いたDNAマイクロアレイ解析を行った結果、S536A変異により発現が低下した遺伝子が53個、逆に発現が上昇した遺伝子が80個見出された。この遺伝子の中で、IKK欠損細胞でも発現が変動していることが報告されている遺伝子14個に絞り、Northern blot法によりmRNA発現を確認した結果、SerpinE2遺伝子の発現がリン酸化依存的に発現することを見出した。また、SerpinE2プロモーター解析を行った結果、-9kbpに存在するκB-like配列にp65が結合することが明らかとなった。現在、リン酸化の転写活性に果たす役割を明らかにするため、プロモーター領域にルシフェラーゼ遺伝子を連結したレポータープラスミドを作製中である。本検討はリン酸化の転写活性化における役割を網羅的に探索するものであり、標的遺伝子の機能解析を通じてリン酸化の抗アポトーシス活性を含めた生理機能解析に重要な情報を提供すると期待される。また、TNF-αによりSer-536リン酸化に関与するTAK1の活性化機構について検討した結果、活性化ループ内のThr-187のリン酸化がTAB1,TAB2により誘導され、逆にp38αによるフィードバック阻害機構において脱リン酸化されることを見出した。

Nf-kappa B p65 サ ブ ユ ニ ッ ト Ser - 536 の リ ン acidification の analytical を physiology, p65 owe damage MEF に wild-type お よ び S536A - variant を to construct し た cells を using い て line っ た. そ の results, S536A cell に お い て も normal に nuclear migration お よ び dna-binding が recognize め ら れ, リ ン acidification は p65 の nuclear migration や プ ロ モ ー タ ー field へ の combining に は influence し な い こ と が Ming ら か と な っ た. そ こ で, リ ン acidification の posthumous son 伝 発 now に す seaborne る influence を adjustable べ る た め に, struck cells を い た DNA マ イ ク ロ ア レ イ parsing line を っ た results, S536A - different に よ り 発 now low が し た heritage 伝 が 53, inverse に 発 now rising が し た heritage 伝 son が 80 show the さ れ た. こ の heritage 伝 child の で, IKK owe damage cells で も 発 が now - move し て い る こ と が report さ れ て い る heritage 伝 son stranded 14 に り, Northern blot method に よ り mRNA 発 を now confirmed し た results, traces of SerpinE2 伝 son の 発 now が リ ン acidification dependent に 発 now す る こ と を shows し た. ま た, SerpinE2 プ ロ モ ー タ ー parsing line を っ た results, 9 KBP に exist す る kappa B - like predominate with column に p65 が combining す る こ と が Ming ら か と な っ た. Now, リ ン acidification の planning write activity に fruit た す "を cut Ming ら か に す る た め, プ ロ モ ー タ ー field に ル シ フ ェ ラ ー ゼ posthumous son 伝 を link し た レ ポ ー タ ー プ ラ ス ミ ド を cropping systems in で あ る. This beg は 検 リ ン acidification の planning write activeness に お け る "を cut the snare に explore す る も の で あ り, mark but 伝 の function analytical を tong じ て リ ン acidification の resistance ア ポ ト ー シ ス contains active を め た analytical に important physiology な intelligence を provide す る と expect さ れ る. ま た, TNF alpha に よ り Ser - 536 リ ン acidification に masato and す る TAK1 の activeness institutions に つ い て beg し 検 た results, active ル ー プ の in Thr - 187 の リ ン acidification が TAB1, TAB2 に よ り induced さ れ, reverse に p38 lightning alpha に よ る フ ィ ー ド バ ッ ク resistance against institutions に お い て リ off ン acidification さ れ る こ と Youdaoplaceholder0 see た.

项目成果

Selective inhibition of TNF-α-induced activation of mitogen-activated protein kinases and metastatic activities by gefitinib.

吉非替尼选择性抑制 TNF-α 诱导的丝裂原激活蛋白激酶的激活和转移活性。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Br. J. Cancer (印刷中)
• 作者: Pattama Singhirunnusorn;Min-Kyung Choo;Kriengsak Krilirdprapamongkol;Yoko Ueno
• 通讯作者: Yoko Ueno

Stimulation of cultured colon 26 cells with TNF-α promotes lung metastasis through the extracellular signal-regulated kinase pathway

• DOI: 10.1016/j.canlet.2004.12.027
• 发表时间: 2005-12-08
• 期刊: CANCER LETTERS
• 影响因子: 9.7
• 作者: Choo, MK;Sakurai, H;Saiki, I
• 通讯作者: Saiki, I

Insufficient p65 phosphorylation at S536 specifically contributes to the lack of NF-κB activation and transformation in resistant JB6 cells

• DOI: 10.1093/carcin/bgh198
• 发表时间: 2004-10-01
• 期刊: CARCINOGENESIS
• 影响因子: 4.7
• 作者: Hu, J;Nakano, H;Colburn, NH
• 通讯作者: Colburn, NH

Critical roles of threonine 187 phosphorylation in cellular stress-induced rapid and transient activation of transforming growth factor-β-activated kinase 1 (TAK1) in a signaling complex containing TAK1-binding protein TAB1 and TAB2

• DOI: 10.1074/jbc.m407537200
• 发表时间: 2005-02-25
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Singhirunnusorn, P;Suzuki, S;Sakurai, H
• 通讯作者: Sakurai, H

Vanillin suppresses tumor invasion and metastasis of breast cancer cells.

香草醛抑制乳腺癌细胞的肿瘤侵袭和转移。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Eur. J. Pharm. Sci. (印刷中)
• 作者: Pattama Singhirunnusorn;Min-Kyung Choo;Kriengsak Krilirdprapamongkol
• 通讯作者: Kriengsak Krilirdprapamongkol