栄養源からのシグナルによる酵母細胞周期の制御機構

营养源信号控制酵母细胞周期的机制

• 批准号: 16026241
• 负责人: 西沢 正文
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16026241/
• 关键词: 細胞周期; サイクロン; 栄養源; ホメオスタシス; 転写制御; サイクリン

Rim101によるCLN2の発現抑制をPho85が解除する機構を解析するために、Pho85とRim101の生化学的相互作用を調べた結果、、Rim101のプロセシングは野生型株とpho85欠失株で差が見られず、さらにRim101のバンドシフトパターンにも大きな違いは見られなかった。これらのことから、Pho85が直接Rim101をリン酸化しているとは考えにくい。RIM101はアルカリ条件下で誘導されることから、pho85欠失株の細胞内pHを測定したところ、野生型株よりもアルカリ側になっていることを見いだした。これより、pho85欠失により細胞内がアルカリ条件となった結果、RIM101発現が誘導され、CLN2抑制が起きると考えるのが妥当と結論した。pho85欠失株中でPho4を過剰発現させると生育停止を引きおこす。Pho4が結合する部位を酵母ゲノム全領域について、クロマチン免疫沈降とゲノム全領域をカバーするtiling arrayへのハイブリダイゼーションを組み合わせたChIP on Chip法によって解析したところ、Pho4がCLN3,WHI5,FKH2など細胞周期を制御する遺伝子の上流域に結合することを見いだした。Pho4が実際にこれら遺伝子のプロモーター領域に結合することを、遺伝子特異的なプライマーを用いて免疫沈降クロマチン画分をPCRで増幅できることで確認した。特にFKH2発現はリン酸濃度とPho4に依存することがわかり、G2/M期の制御にPho85-Pho4が関与する可能性が示された。

Rim101 and CLN2 expression inhibition mechanism analysis, Pho 85 and Rim101 biochemical interaction modulation results, Rim101 wild type strain and pho85 lack of plant differentiation, Rim 101 in the absence of large plant differentiation. Pho85 is directly connected to Rim101. The intracellular pH of RIM101 and pho85 were measured under different conditions. The results showed that RIM101 could be induced and CLN2 could be inhibited. Pho85 is missing. Pho4 is missing. Pho4, CLN3,WHI5,FKH2, Cell Cycle Control, Cell Cycle Control, Cell Pho4 is the most common type of protein that can be detected by PCR. In particular, FKH2 production depends on the concentration of Pho4, and the possibility of regulation of Pho85-Pho4 in G2/M period is shown.

项目成果

Pho85 kinase is required for proper gene expression during the diauxic shift

Pho85 激酶是双轴转变期间正确基因表达所必需的

• 发表时间: 2004
• 期刊: Yeast 21
• 作者: Nishizawa;et al.
• 通讯作者: et al.