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栄養源からのシグナルによる酵母細胞周期の制御機構

营养源信号控制酵母细胞周期的机制

基本信息

批准号：
13043046
负责人：
西沢正文
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13043046/
关键词：
細胞周期酵母サイクリン依存性キナーゼ糖代謝ジーンチップ

项目摘要

1.Pho85-サイクリン遺伝子の栄養源による発現制御すでにノーザン解析の結果から、定常期(〜48時間)ではPCL5の発現量が減少し、PCL7の発現量が上昇することを見いだしていたが、ジーンチップを用いた解析結果からは22時間までの培養時間中に10種のサイクリンの内どれも顕著な発現量の変動を見せなかった。一方、非発酵性炭素源ではPCL7以外のサイクリンの発現量の減少が見られた。これらのことは、Pho85-サイクリン遺伝子の発現制御は培養時間と炭素源でそれぞれ異なる機構で行われている可能性、そしてdiauxic shiftに伴う遺伝子発現変化に対するPHO85の影響(後述)にはサイクリン蛋白質の安定性の方が重要な役割を果たしている可能性を示している。このことを確認するために各サイクリン遺伝子のプロモーター(〜1kb)とlacZのレポーターを作製したが、一部のものしか十分な活性を示さなかったため、現在2kbまで伸ばしたものを作製中である。2.栄養源からのシグナル伝達機構におけるPho85キナーゼの標的の探索と同定 Diauxic shiftに伴う遺伝子発現の変化に対するpho85変異の影響を調べるため、培養開始後、9, 13, 17, 22時間に抽出したmRNAについてジーンチップ解析を行った。Diauxic shiftに伴い、糖代謝系のシフト、ミトコンドリア機能の昂進、蛋白質合成の低下が起こることが知られているが、pho85欠失株ではこのような変化に伴う遺伝子発現の変動が正しいタイミングで起こらないことがわかった。糖新生系およびglyoxylate cycle酵素遺伝子の上流にはCSREと呼ばれる調節配列があるが、この配列を持つERG13やCYB5でもpho85欠失株ではdiauxic shift後の発現上昇が見られないことから、CSREを介した発現制御にPHO85が関与している可能性が考えられる。また微量元素金属センサーであるCTR1, CTR3, FRE7, ZRT1の発現もpho85欠失株では正しく制御されず、これらを共通して制御する転写因子Mac1がPho85の標的である可能性が考えられる。これらの結果は、Pho85キナーゼがこれまで考えられていた以上に広い範囲で栄養源からのシグナル伝達に関与している可能性を示している。

1. Pho85-the source of the monitoring system is responsible for the analysis of the results, the steady period (~ 48 time), the lower PCL5 load, the higher the PCL7 load, the lower the output, and the higher the clock load. The results of the analysis of the results show that there are 10 kinds of equipment in the training time of 22 hours. On the one hand, non-fermentative carbon sources other than PCL7 are used to reduce the amount of non-fermentative carbon. It is possible to control the operation of carbon source equipment during the training period, and to realize the possibility that diauxic shift can be used to improve the quality of PHO85 (later). In the end, it is necessary to improve the stability of protein in order to improve the stability of protein. Please make sure that you can make sure that you are in the middle of a movie, and that a movie is very active, and that you are now in the middle of a movie. Please make sure that you are in the middle of a movie. Please make sure that you do not know what to do. Please make sure that you are in the middle of a movie. One movie is very active. It shows that you are in the middle of the game. Now you are in the middle of the 2kb. two。 The exploration of the registration of the Pho85 in the same way as that of the Diauxic shift. After the start of the training program, after 9, 13, 17 and 22 hours after the start of the training program, the analysis bank will be drawn out at 9, 13, 17 and 22 after the start of the training. Diauxic shift concomitant, glycosylated products, high molecular weight, low protein synthesis, high protein synthesis, low protein synthesis, high protein synthesis, low protein synthesis, high protein synthesis, The sugar newborn department is called "CSRE", "glyoxylate cycle enzyme", "high-end", "CSRE", "CYB5", "pho85", "diauxic shift", "diauxic shift", "CSRE", "control", "PHO85" and "possibility". Trace element metals, such as CTR1, CTR3, FRE7, ZRT1, have been found to be deficient in pho85. They are in common with each other. They are responsible for the possibility of writing the Mac1 Pho85 factor. The results of the test, the Pho85 data, the results, the results, the results and the results.