ヒトES細胞からの脂肪血管前駆細胞の同定と脂肪細胞機能異常の発生細胞学的解析

人 ES 细胞中脂肪血管祖细胞的鉴定以及脂肪细胞功能障碍的发育细胞学分析

• 批准号: 16046212
• 负责人: 伊藤 裕
• 金额: $ 4.99万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16046212/
• 关键词: ES細胞; 前駆細胞; 発生分化; 形質変換; マイクロアレイ

脂肪細胞の肥大増殖に伴う形質転換のプロセスの理解において脂肪細胞の起源発生分化の正確な把握が不可欠である。無限の増殖能と全能性を有するES細胞は、細胞分化解析の好適のマテリアルである。我々は、VEGF受容体の一つであるFlk1陽性細胞を純化し、Flk1陽性細胞が血管前駆細胞(ES cell-derived vascular progenitor cells ; ES-VPC)であることを発見した。更に我々は、日本初のヒトES細胞を用いた研究を開始した。本研究課題はヒトES細胞由来間葉系前駆細胞、更に脂肪血管前駆細胞を同定し、脂肪細胞の発生分化をin vitroで単一細胞レベルでトレースし脂肪細胞分化因子を網羅的に探索するとともに、その成果をメタボリックシンドロームの成因解明及び脂肪細胞機能是正治療法への応用を目指すものである。我々は、ヒトES細胞を用い、TRA-1-VEGFR-2+PDGFR+VEカドヘリン-分画が血管前駆細胞(hES-VPC)であることを明らかにした。hES-VPCに対してインスリン、デキサメサゾン、IBMX、ピオグリタゾンを用いた脂肪細胞分化を行っても脂肪細胞への分化は認められなかったが、コラーゲンIV上hES-VPCを低血清、PDGF-BB刺激下で30日間培養した細胞では、ある程度脂肪滴を有した細胞に分化した。またこの細胞群に骨分化刺激を行ったところ、アルシアンブルー陽性細胞の出現が認められた。この細胞の約70%では間葉系細胞マーカーであるCD90等が陽性であった。またこれら未分化hES、hES-VPC、およびhES-VPCより分化させた内皮細胞、血管平滑筋細胞よりmRNAを回収し、アフィメトリックス社のジーンチップを用い、マイクロアレイ解析を行った。その結果、hES-VPCの遺伝子発現は最近報告されたhES由来間葉系前駆細胞のそれとの間にある程度の相同性が認められた。

The understanding of adipocyte hypertrophy and proliferation accompanied by morphological and qualitative changes and the correct understanding of adipocyte origin and differentiation are indispensable. ES cells are capable of unlimited proliferation and totipotency, and they are suitable for cell differentiation. Flk1-positive cells were purified and ES cell-derived vascular progenitor cells (ES-VPC) were identified. The study of ES cells in Japan began. This research topic is to explore the origin of ES cells from mesenchymal progenitor cells, and the identification of adipocyte differentiation factors in vitro, and to clarify the causes of adipocyte differentiation and adipocyte function. We use TRA-1-VEGFR-2+PDGFR+VE to differentiate vascular progenitor cells (hES-VPC). hES-VPC was cultured in low serum and PDGF-BB for 30 days. The cell population was stimulated by bone differentiation, and the appearance of positive cells was recognized. About 70% of the cells are mesophyll cells. The expression of mRNA in undifferentiated hES, hES-VPC, hES-VPC and vascular smooth muscle cells was analyzed. The results showed that hES-VPC gene expression was similar to that of hES-VPC gene expression.

项目成果

Differentiation from embryonic stem cells to vascular wall cells finder in vitro pulsatile flow loading.

从胚胎干细胞分化为血管壁细胞的体外脉动流加载。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Artif.Organs 8
• 作者: H.Huang;et al.
• 通讯作者: et al.

The PTEN/PI3K pathway governs normal vascular development an tumor angiogenesis.

PTEN/PI3K 通路控制正常血管发育和肿瘤血管生成。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Genes & Development 19
• 作者: K.Hamada;et al.
• 通讯作者: et al.

Analysis of rat insulin II promoter-ghrelin transgenic mice and rat glucagons promoter-ghrelin transgenic mice

大鼠胰岛素II启动子-ghrelin转基因小鼠和大鼠胰高血糖素启动子-ghrelin转基因小鼠的分析

• 发表时间: 2006
• 期刊: J Biol Chem. 280・15
• 作者: Suzuki S;Tanaka K;Suzuki N;Iwakura H
• 通讯作者: Iwakura H

Angiotensin II suppresses growth arrest specific homeobox (Gax) expression via redox-sensitive mitogen-activated protein kinase (MAPK)

• DOI: 10.1016/j.regpep.2004.11.006
• 发表时间: 2005-04
• 期刊: Regulatory Peptides
• 作者: Takatoshi Saito;H. Itoh;J. Yamashita;K. Doi;T. Chun;Tokuji Tanaka;M. Inoue;K. Masatsugu;Y. F

Expression of the adrenomedullin gene in adipose tissue

• DOI: 10.1016/j.regpep.2005.07.006
• 发表时间: 2005-12-15
• 期刊: REGULATORY PEPTIDES
• 作者: Nambu, T;Arai, H;Nakao, K
• 通讯作者: Nakao, K