ゲノム不安定を誘導する中心体複製制御因子の機能解析

诱导基因组不稳定的中心体复制调节因子的功能分析

• 批准号: 17014072
• 负责人: 桑原 一彦
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17014072/
• 关键词: 中心体複製; ゲノム不安定性; 遺伝子矢損マウス; トランスジェニックマウス; 腫瘍発生

中心体複製制御分子であるSHD1の中心体複製制御を明らかにする目的で、SHD1と他の中心体複製に関与する分子との関連、ゲノム不安定性に及ぼす影響、さらにSHD1による中心体複製異常が個体レベルでどのような影響を及ぽすのか(特に腫瘍化の誘導)に関して解析した。まず、SHD1に結合する分子の同定を酵母ツーハイブリッドによって行った。その結果、既知のDNA複製やDNA組換えに関与すると考えられている3種類の分子がSHD1と結合することが明らかとなった。これらの分子が中心体に局在するという報告はこれまでなく、抗体作成によって確かに中心体に局在することを明らかにしようとしたが、現在までに良い抗体が樹立できずこの点は今後の課題である。これら3種類の分子とSHD1がどの領域で結合しているかを遺伝子導入実験で明らかにした。線維芽細胞株にSHD1を過剰発現させると中心体の多重化が起こるが、この時染色体数の増加及び染色体の融合等が観察され、ゲノム不安定性が細胞レベルで誘導されることを明らかにした。しかし、この細胞株を免疫不全マウスに移植しても腫瘍形成は見られなかった。SHD1による中心体複製異常がin vivoでどのような影響を及ぼすのかを明らかにするために、コンディショナルSHD1欠損マウスと1ckプロモーター制御下にSHD1を過剰発現させたトランスジェニックマウスを作成した。前者はまずB細胞でのみ欠損させて、B細胞分化や増殖を解析したが、コントロールマウスと比べて大きな差は認めなかった。マウスの個体レベルではSHD1の機能を代償する分子の存在が考えられ、現在CAG-Creマウスとの交配によって全身型SHD1欠損マウスを作成しているところである。後者に関しては、Tリンパ腫の発症を解析するために現在Ba1b/cマウスへバッククロスしている。

Centrosome replication control molecule SHD1 Centrosome replication The expression of SHD1 was determined by DNA sequencing. The results show that there are three kinds of molecules involved in DNA replication and DNA assembly. This is the first time that a molecule has been identified. The three species of molecules and SHD1 are combined in the field and introduced into the field. The centrosome multiplexing of SHD1 in line bud cell line was observed during the development of chromosome number and fusion, and the instability of chromosome was observed during the induction of chromosome number. The cell lines are immune to the disease. SHD1 Centrosome Replication Abnormality in Vivo and in Vivo, SHD1 Deficiency in Vivo and in Vivo The former is a B cell differentiation and growth analysis, and the latter is a big difference from the former. The individual SHD1 function is compensated by the presence of a molecule that is present in the CAG-Cre mating system. The latter is related to the analysis of T_(1b) and T_(1c).

项目成果

Increased expression of germinal center-associated nuclear protein (GANP) is associated with malignant transformation of melanocytes

• DOI: 10.1016/j.jdermsci.2005.12.007
• 发表时间: 2006-04-01
• 期刊: JOURNAL OF DERMATOLOGICAL SCIENCE
• 影响因子: 4.6
• 作者: Kageshita, T;Kuwahara, K;Sakaguchi, N
• 通讯作者: Sakaguchi, N

Production of two novel monoclonal antibodies that distinguish mouse lymphatic and blood vascular endothelial cells

• DOI: 10.1007/s00429-006-0091-3
• 发表时间: 2006-10-01
• 期刊: ANATOMY AND EMBRYOLOGY
• 作者: Ezaki, Taichi;Kuwahara, Kazuhiko;Matsuno, Kenjiro
• 通讯作者: Matsuno, Kenjiro

Cutting Edge : Double-stranded DNA breaks in the immunoglobulin V-region gene were detected at lower frequency in affinity-maturation impeded GANP^<-/-> mice.

最前沿：在亲和力成熟受阻的 GANP^-/- 小鼠中以较低频率检测到免疫球蛋白 V 区基因中的双链 DNA 断裂。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Immunology 175・9
• 作者: Y.Kawatani;H.Igarashi;T.Matsui;K.Kuwahara.S.Fujimura;N.Okamoto;K.Takagi;N.Sakaguchi
• 通讯作者: N.Sakaguchi

Increased expression of germinal center-associated nuclear protein RNA-primase is associated with lymphomagenesis

• DOI: 10.1158/0008-5472.can-04-3259
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: CANCER RESEARCH
• 影响因子: 11.2
• 作者: Fujimura, S;Xing, Y;Sakaguchi, N
• 通讯作者: Sakaguchi, N

Generation of high-affinity antibody against T cell-dependent antigen in ganp gene-transgenic mouse.

在 ganp 基因转基因小鼠中产生针对 T 细胞依赖性抗原的高亲和力抗体。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Immunology 174・8
• 作者: N.Sakaguchi;T.Kimura;S.Matsushita;S.Fujimura;J.Shibata;M.Araki;T.Sakamoto;C.Minoda;K.Kuwahara
• 通讯作者: K.Kuwahara