ゲノム不安定性誘導における哺乳動物Sac3相同分子の機能

哺乳动物 Sac3 同源物在诱导基因组不稳定中的功能

• 批准号: 18013041
• 负责人: 桑原 一彦
• 金额: $ 3.26万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18013041/
• 关键词: 発癌; 中心体複製; ゲノム不安定性

本研究では1)SHD1結合分子の同定、2)遺伝子変異マウスを用いたSHD1の機能解析の二点を中心に行った。1)に関して、三種類の結合分子をプロテオミクスによって同定し、いずれも遺伝子共発現でSHD1との結合を証明しているが、二種類の既知分子に関してはこれまで中心体への局在は報告されていない。残りの新規分子THP1に関して解析を継続した。抗THP1抗体の作成に成功していないため、THP1が実際に中心体でSHD1と結合しているかに関してはまだ不明である。生体内におけるTHP1の機能を解析する目的でB細胞特異的THP1欠損マウスを作成して解析した。その結果末梢リンパ組織におけるB細胞数が激減し、FACS解析で成熟B細胞の割合が減少していた。脾臓のTHP1欠損B細胞を種々のマイトジェンで刺激して増殖能を調べたがコントロールと比べて著変はなく、細胞死によって成熟B細胞数が減少していることが示唆された。そこで、NIH3T3細胞にTHP1siRNAを導入し、48時間後に細胞周期を検討した。その結果、コントロールsiRNAを導入した細胞に比べて明らかにアポトーシスが増加していた。アポトーシス誘導の分子機構を明らかにするために、THP1siRNA導入細胞において発現変動がある遺伝子を探索したところ、Baxの転写誘導が起こっていた。THP1の発現は細胞の生存維持に重要であることが判明した。2)に関してSHD1欠損マウスを作成して解析したが、これまでに顕著な表現系は得らなかった。そこで1ck-SHD1トランスジェニックマウスを作成後、Balb/cマウスにバッククロスし、中心体多重化から腫瘍発症に至るか、を解析した。しかし、このトランスジェニックマウスはT細胞分化に障害はなく、一年以上の経過観察でも明らかな腫瘍発症を認めなかった。

In this study, there are two points in the functional analysis of SHD1: 1) identity of SHD1 binding molecules; 2) genetic diversity of SHD1 binding molecules. 1) Three kinds of binding molecules are involved in the study of SHD1 and SHD 2 binding. The new molecule THP1 was analyzed. Anti-THP 1 antibody was successfully produced, THP1 was actually centrosome, SHD1 was bound to SHD1, and the relationship between THP 1 and SHD 1 was unknown. To analyze the function of THP1 in vivo, we need to analyze the deficiency of THP1 specific to B cells. As a result, the number of B cells in peripheral tissues decreased dramatically, and FACS analysis showed that the number of mature B cells decreased. The number of mature B cells decreased after THP1 treatment. THP1 siRNA was introduced into NIH 3T3 cells 48 hours after cell cycle initiation. As a result, siRNA was introduced into the cells, and the results showed that siRNA was not introduced into the cells. The expression of THP1 siRNA was detected by PCR and the expression of THP1 mRNA was detected by PCR. THP1 is important for cell survival. 2) SHD1 is not enough to make analysis, but it is not enough to make performance system. After the creation of 1ck-SHD1, Balb/c, centrosome multiplexing, swelling, and disease analysis T-cell differentiation is a disease that can only be detected after more than one year.

项目成果

Characterization of ganp gene abnormality in human breast cancer

人类乳腺癌 ganp 基因异常的特征

• 发表时间: 2007
• 作者: Sakai T;Liu L;Teng X;Ishimaru N;Sakai R;Tran HN;Sano N;Hayashi Y;Kaji R;Fukui K;Kazuhiko Kuwahara;Takashi Sakai;Kazuhiko Kuwahara;Kuwahara K.;Kazuhiko Kuwahara
• 通讯作者: Kazuhiko Kuwahara

Germinal center B-cell-associated DNA hypomethylation at transcriptional regions of the AID gene

• DOI: 10.1016/j.molimm.2007.09.023
• 发表时间: 2008-03-01
• 期刊: MOLECULAR IMMUNOLOGY
• 影响因子: 3.6
• 作者: Fujimura, Satoru;Matsui, Takeshi;Sakaguchi, Nobuo
• 通讯作者: Sakaguchi, Nobuo

Increased expression of germinal center-associated nuclear protein (GANP) is associated with malignant transformation of melanocytes

• DOI: 10.1016/j.jdermsci.2005.12.007
• 发表时间: 2006-04-01
• 期刊: JOURNAL OF DERMATOLOGICAL SCIENCE
• 影响因子: 4.6
• 作者: Kageshita, T;Kuwahara, K;Sakaguchi, N
• 通讯作者: Sakaguchi, N

GANP suppresses DNA recombination, measured by direct-repeat β-galactosidase geneconstruct, but does not suppress the type ofrecombination applying to immunogolobulingenes in mammalian cells.

GANP 抑制 DNA 重组（通过直接重复 β-半乳糖苷酶基因构建体测量），但不抑制哺乳动物细胞中免疫球蛋白基因的重组类型。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Genes to Cells 12(10)
• 作者: 斉藤まさ子、櫻井信司;他;Yoshida M.
• 通讯作者: Yoshida M.

Production of two novel monoclonal antibodies that distinguish mouse lymphatic and blood vascular endothelial cells

• DOI: 10.1007/s00429-006-0091-3
• 发表时间: 2006-10-01
• 期刊: ANATOMY AND EMBRYOLOGY
• 作者: Ezaki, Taichi;Kuwahara, Kazuhiko;Matsuno, Kenjiro
• 通讯作者: Matsuno, Kenjiro