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機能ゲノミクスと遺伝学的に手法による線虫の化学走性学習の分子機構の解明

利用功能基因组学和遗传学方法阐明线虫趋化学习的分子机制

基本信息

批准号：
17017011
负责人：
飯野雄一
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

線虫C.エレガンスの化学走性行動は特定の化学物質に近寄る、あるいはそれから遠ざかる行動である。さまざまな化学物質に対して、それを受容する感覚神経がそれぞれ同定されており、化学走性行動には可塑性も観察されるため、神経機能の理解のよいモデルとなる。本研究では、神経細胞種に特異的な遺伝子発現をゲノムワイドに解析することにより、化学走性やその可塑性の機構の理解に役立てることを目的とした。線虫の特定の組織・細胞からmRNAを選択的に精製する方法として、mRNA tagging法を開発した。この方法は、mRNAのポリAに結合する性質のあるポリA結合蛋白質(PABP)にタグ配列をつけたものを細胞特異的プロモーターで特定の細胞群に発現させ、タグに対する抗体を用いて免疫沈降することにより、その細胞群に含まれるmRNAを特異的に回収する方法である。この方法を約50細胞からなる感覚神経群に適用し、単離したmRNAを用いてマイクロアレイ解析を行うことにより、感覚神経に発現する遺伝子群の同定に成功した。さらに、この方法を異なるイオンを受容する左右のASE感覚神経(それぞれ一個の神経細胞)に適用し、左右で非対称に発現する遺伝子の体系的な同定を試みた。mRNA tagging法でmRNAを単離後、RT-PCRで左右非対称に発現することのわかっている遺伝子のmRNAの回収量を調べた。その結果、ASER株由来mRNA:ASEL株由来mRNAでの量比に関して、右のASERで発現するgcy-5では5.4倍、左のASELで発現するgcy-6で10倍、gcy-7で91倍の濃縮が確認された。単離したmRNAをプローブに用いて、全ゲノムオリゴアレイにハイブリダイゼーションを行い、左右非対称に発現する多くの候補遺伝子を同定し、そのうち若干数については確かに左右非対称に発現することを確認した。

C. Chemical walking activities, chemical walking activities, chemical walking behavior, chemical walking behavior, The chemical and chemical materials are not allowed to be tested, and the chemical sexual behavior is used to monitor the plasticity, and the machine is able to understand it. The purpose of this study is to understand the purpose of the mechanism of plasticity in this study. the purpose of this study is to analyze the mechanism of plasticity in this study. The worm-specific tissue cell examines the selected mRNA method and the mRNA tagging method opens the test. The method and the mRNA antibody were combined with the fusion protein (PABP). The specific cell population of the specific cell group was detected, the antibody was immunized with the immune deposit antibody, and the cell population contained the specific cell population of the mRNA specific cell. The method is about 50%. The method is to determine the success of the subgroup, and to determine the success of the subgroup. The method is about 50%, and the method is about 50%. The method is about 50%, and the method is about 50%. The method is about 50%, so as to determine the success of the subgroup. You can use this method to determine whether or not to use the ASE sensor to realize the identity of the sub-system. After the mRNA tagging method was used to mRNA, the RT-PCR method was used to measure the number of errors in the mRNA. The results showed that ASER strain originated from mRNA:ASEL strain, the quantity of mRNA strain was 5.4times higher than that of ASER strain, that of ASEL strain was 10 times of that of ASEL strain, and that of gcy-7 strain was 91 times. Do not know if you are using the mRNA. You may need to know that you are not aware of the number of data on the left and right of the computer.