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腋芽の休眼解除に関する分子機能の解析

腋芽释放相关分子功能分析

基本信息

批准号：
17027013
负责人：
森仁志
金额：
$ 4.1万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

エンドウのPsIPT2プロモーター::GUSを導入したシロイヌナズナをオーキシンで処理すると、オーキシンに応答してエンドウ組織内と同様な時間経過でGUS mRNAが減少した。この形質転換体は、実生全体がGUS染色されるが、オーキシン濃度が高く、常に伸長している根端はGUS染色されない。そこでこの系を用いて、PsIPT2遺伝子のオーキシンによる転写抑制機構を解析するために、プロモーター約2kbを全領域にわたって順次100baseずつ欠失させたプロモーターを作製した後、GUS遺伝子と融合させたDNAを構築し、この改変PsIPT2プロモーター::GUSをシロイヌナズナに導入して形質転換体を作製した。これらの形質転換体の解析を行ったところ、転写開始点から-1516から-1598塩基上流の領域を欠失させたプロモーターを導入した形質転換体では、根端もGUS染色されることが分かった。この領域にオーキシンによって転写が抑制されるために必要なシス領域が含まれている可能性が高い。頂芽切除3時間後から茎のサイトカイニンは増加し、12時間後をピークに徐々に減少する。一方、茎のIAAは頂芽切除後減少し、12時間後から徐々に増加してきた。茎におけるサイトカイニンの減少は、新たに頂芽となった腋芽で生合成されたIAAが茎を流れ、PsIPT2の転写を抑制し、サイトカイニン生合成を抑制した結果であるとともに、サイトカイニンを代謝するcytokinin oxidase(CKX)の働きにより、サイトカイニンが分解された結果と推測される。そこで頂芽切除12時間後の茎からCKXのcDNAを単離してその発現を解析した。茎からは転写の確認できたCKXが2つ単離された。そのうちの一つのCKXはオーキシンで著しい誘導を受けた。頂芽切除9時間後までCKXは転写が減少するが、18時間後には茎において誘導されることが分かった。新たな頂芽から流れてきたオーキシンによって、誘導されたと考えられた。また無傷の茎をTIBA処理すると下位の茎でのCKXの転写は検出できなくなった。

PsIPT2 gene expression: GUS gene expression is reduced in the tissues after the gene is introduced. The GUS staining was observed in the whole body of the plant, and the GUS staining was observed in the root tip of the plant. In this case, the PsIPT2 gene fusion gene is used to construct DNA, and the PsIPT2 gene fusion gene is used to construct DNA. The analysis of the morphological transformation was carried out at a starting point of-1516 The possibility that the domain may be contained in the domain is high. 3 hours after the apical bud was removed, the number of stems increased, and 12 hours later, the number of stems decreased. A square, stem and IAA decreased after the top bud was removed, and increased after 12 hours. The results of the study indicate that the reduction of cytokinin oxidase (CKX) in stem cells, the growth of new apical buds and axillary buds, the inhibition of IAA flow in stem cells, the inhibition of PsIPT2 production, and the inhibition of cytokinin oxidase (CKX) production in stem cells, and the reduction of cytokinin oxidase(CKX) production in stem cells. The cDNA of CKX was isolated from the stem 12 hours after the apical bud was removed.茎からは転写の确认できたCKXが2つ単离された。The CKX is the best way to get rid of the virus. After 9 hours of apical bud removal, CKX was reduced, and after 18 hours, CKX was induced. The new generation of Chinese medicine has been introduced into the world. No damage to the stem TIBA treatment of the lower stem CKX write out of the box