イオン輸送性回転モーターの分子構造とサブユニット間の機能協関

离子传输旋转电机的分子结构和亚基之间的功能关系

• 批准号: 17048018
• 负责人: 柿沼 喜己
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17048018/
• 关键词: ATPase; 回転モーター; ナトリウム; イオン; 腸球菌

腸球菌Na+輸送性V-ATPaseのNtpKとNtpIの構造と機能及びその相互作用に関して以下の点を明らかにした。(i)^<22>Na^+を用いて精製NtpKリングによるNa^+結合の親和性を調べたところ、NtpK1分子あたり約1個のNa^+が約40μMのKd値で結合すると算出された。NtpKリングに結合した^<22>Na^+は、Na^+あるいはLi^+によりほぼ完全にchaseされたが、K^+,Cs^+,Ca^<2+>などのカチオンによっては全くchaseされなかった。(ii)Li^+結合型NtpKリングの結晶化及びX線結晶構造解析を行い。2.8Åの分解能による解析に成功した。Na^+結合型NtpKリングのイオン結合様式と類似しており、Na^+と酸素原子とが約2.32Åの平均距離で配位していたのに対して、Li^+は約2.16Åの平均距離で配位していることがわかった。(iii)V-ATPaseの全複合体におけるV_0部分の構造上の位置づけを明らかにするために、9種類のサブユニットから構成されるV-ATPase複合体の全体像を把握するために、9個の各サブユニット遺伝子の欠失株より細胞膜画分を調製し、界面活性剤による可溶化後、グリセロール密度勾配遠心を行って、V_0V_1複合体の形成について調べた。その結果、帰属が不明であったR,Gサブユニットを含めてA,B,C,D,E,GサブユニットがV_1部分を構成し、I,KサブユニットがV_0部分を構成することがわかった。この解析の過程でBサブユニットを欠失していても、少なくともA,C,D,I,Kサブユニットから構成される複合体が形成されることが新たにわかり、Aサブユニットが固定子の構築に関わることと考えられた。

The Na+ delivery V-ATPase NtpK NtpI machine can interact with each other. Please check the following points. (I) ^ & lt;22> Na ^ + is used to calculate the temperature difference with the combination of NtpK and NtpK1 molecules, about 40 μ M of Na ^ +. The combination of NtpK

项目成果

Structure and mechanism of vacuolar Na+-translocating ATPase from Enterococcus hirae

• DOI: 10.1007/s10863-005-9481-0
• 发表时间: 2005-12-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOENERGETICS AND BIOMEMBRANES
• 影响因子: 3
• 作者: Murata, T;Yamato, I;Kakinuma, Y
• 通讯作者: Kakinuma, Y

Structure of the rotor of the V-type Na+-ATPase from Enterococcus hirae

• DOI: 10.1126/science.1110064
• 发表时间: 2005-04-29
• 期刊: SCIENCE
• 影响因子: 56.9
• 作者: Murata, T;Yamato, I;Walker, JE
• 通讯作者: Walker, JE

V型Na+-ATPaseの膜内在性ローターリングの構造 : 結晶構造から見えてきた回転モーターのイオン透過機構

V型Na+-ATP酶整体膜转子环结构：从晶体结构揭示旋转电机的离子渗透机制

• 发表时间: 2006
• 期刊: 生物物理 46
• 作者: 村田武士;山登一郎;柿沼喜己
• 通讯作者: 柿沼喜己

Delection analysis of the subunit gene of V-type Na+-ATPase from Enterococcus hirae

海拉肠球菌V型Na-ATP酶亚基基因的缺失分析

• 发表时间: 2006
• 期刊: J. Biochem (Tokyo) 139
• 作者: T.Hosaka;K.Takase;T.Murata;Y.Kakinuma;I.Yamato
• 通讯作者: I.Yamato