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クロモキネシンKidによる分裂後期の染色体動態と娘細胞核形成の制御機構

染色因子Kid对后期和子细胞核形成过程中染色体动力学的控制机制

基本信息

批准号：
17050006
负责人：
大杉美穂
金额：
$ 4.1万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

クロモキネシンKidは染色体腕の中期板整列や、中期紡錘体長の維持を担うことが明らかにされているモーター分子である。我々はRNAiによる発現抑制の結果から、Kidは分裂後期にも染色体整列とは独立の働きを担っていることを見いだし、昨年度までにKidが分裂後期/終期染色体の一塊化、正常な核ラミナの形成に寄与していることを見いだした。本年度は主にKid欠損マウスの解析を行い、以下の点を明らかにした。1)129系統とc57BL/6系統のミックスバックグラウンドにおいて、Kid-/-胚盤胞胚はメンデルの法則から予想される数の約半数しかいないが、生存していたKid-/-胚盤胞はすべて野生型のものと同様の正常な核形態、胚形態を示していた。2)Kid-/-胚は8細胞期まではメンデルの法則に従う割合で確認されるが、2細胞期においても約半数の胚では多核や微小核など分裂異常が原因と考えられる核形成異常を示していた。3)mRNAを前核期胚にinjectionすることでEGFPを融合した染色体結合タンパク質部分断片を発現させ、第一体細胞分裂(第一卵割)期の染色体動態を可視化し、time-lapse観察を行った。その結果、Kid-/-胚では染色体の整列、後期への移行には明らかな異常が見られなかったが、分裂後期/終期の染色体のまとまりが悪く、その結果一部の染色体の周囲に個別の核膜が形成される様子が観察された。以上の結果から、HeLa細胞で得られた結果と同様に、Kidは生体内においても分裂後期/終期の染色体一塊化を担っており、その働きは特に卵割初期の分裂において重要であることが示唆された。

The metaphase plate alignment of chromosomes, the maintenance of metaphase spindle length, and the molecular structure of chromosomes. The result of RNAi inhibition is that Kid is involved in chromosome alignment and independence at anaphase, and Kid is involved in chromosome fragmentation at anaphase/telophase. This year, the main Kid's loss analysis, the following points 1)129 In the C57BL/6 system, about half of the number of Kid-/-blastoderm cells expected to survive under the rule of the wild-type and the same normal nuclear morphology and embryo morphology are shown. 2)Kid-/-embryo 8-cell stage, 2-cell stage, 2-cell 3)mRNA injection at the pre-nuclear embryo stage, EGFP fusion, chromosome binding, cytoplasmic fragment development, visualization of chromosome dynamics at the first somatic cell division (first egg division) stage, time-lapse observation Chromosome alignment, anaphase transition, anaphase anomaly, anaphase/telophase chromosome alignment, chromosome cycle, individual nuclear membrane formation, etc. The above results show that HeLa cells have the same results and that Kid cells have the same chromosome fragmentation in anaphase/telophase.