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温度依存性性決定の分子メカニズム

温度依赖性测定的分子机制

基本信息

批准号：
17052018
负责人：
北野健
金额：
$ 4.8万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17052018/
关键词：
性決定ヒラメメダカ性分化アロマターゼ

项目摘要

本研究では、温度依存性性決定機構を持つヒラメを用いて、温度依存性性決定の分子メカニズムの解明を試みた。アロマターゼは、ヒラメ雌への性分化に不可欠であり、高水温による雄化に伴い発現量が減少する。このアロマターゼ遺伝子の発現を調節する因子の候補を得るため、ヒラメアロマターゼ遺伝子の5'上流域の塩基配列を調べたところ、Fox12 binding siteとcAMP response element(CRE)を確認した。このことから、転写因子Fox12及びCREを介するシグナル伝達経路を持つ生殖腺刺激ホルモンが、アロマターゼの発現に性差を導きだす因子の候補として挙げられた。昨年度、ヒラメFox12 cDNAの塩基配列を決定し、そのmRNAの発現パターンを調べ、ヒラメFox12とFox12 binding siteとの結合性を確認した。そこで今年度は、レポーターアッセイを用いてFox12がアロマターゼの転写活性を上昇させるどうかを調べた結果、Fox12の濃度依存的に転写活性が上昇することが明らかとなった。これらのことから、Fox12はアロマターゼ遺伝子の発現を直接誘導している可能性が考えられた。次に、生殖腺刺激ホルモン(FSH, LH)及びその受容体(FSH受容体、LH受容体)mRNAの発現をRT-PCRで調べた結果、FSH、LH、LH受容体mRNAの発現は雌雄で検出されたが、FSH受容体mRNAの発現は、高水温(雄化温度)で飼育した個体でのみ抑制されていた。また、無血清培地を用いたヒラメ生殖腺培養系を初めて開発し、この系にリコンビナントFSH(rFSH)またはrLHを投与して培養した結果、rFSHを投与した試験区でのみアロマターゼmRNAの発現が維持されたことから、性分化時期におけるアロマターゼ遺伝子の発現制御に、FSHシグナリングが関与している事が示唆された。

In this study, the temperature-dependent determination mechanism is consistent with the use of temperature-dependent determination mechanism and temperature-dependent determination mechanism. The sexual differentiation of female, female, male, male, female, male, male, female, female, In this case, you can see that there are many factors in the watershed in the upper watershed, such as the cAMP response element (CRE), the base line, and the cAMP response element (CRE). There are three factors, namely, Fox12, CRE, and so on. Gonad stimulation, gonadal stimulation, gonadal stimulation, gon Last year, the Fox12 cDNA base was assigned to confirm the combination of the decision, the mRNA, and the Fox12 Fox12 binding site. For the current year, please tell me how to write the results on the Fox12 activity, and on the Fox12 severity-dependent write activity. Please tell me that you will be able to directly guide the possibility that you will be able to do so. You will be able to find out the possibility of using Fox12. Secondary gonadal stimulation, gonadal stimulation (FSH, LH) and gonadal receptivity (FSH receptive, LH receptive) mRNA showed that FSH, LH, LH receptive mRNA showed that both sexes were abnormal, FSH receptive mRNA was present, high water temperature (masculinization temperature) and high water temperature (masculinization temperature) could inhibit the growth of pregnant women. Gonadal culture in vitro, serum-free culture, gonad culture, gonadal culture, gonadal culture, gonadal FSH told me that I was instigated by the incident.