左右非対称な器官形成を支配する、遺伝子発現制御機構の解明

阐明控制不对称器官形成的基因表达控制机制

• 批准号: 17054024
• 负责人: 白鳥 秀卓
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17054024/
• 关键词: 器官形成; 左右軸; 発生生物学; Pitx2; 転写制御

1.Pitx2の発生時期特異的な役割や、Pitx2発現細胞の細胞系譜の追跡Pitx2が器官形成前のみ発現するトランスジーンや、野生型ASE(左側特異的なエンハンサー)によってPitx2を発現させるトランスジーンをPitx2 ASE欠損マウスに挿入し、その表現型の回復を解析した。その結果、どの器官の正しい左右非対称性形成にも、マウス胎生9日目以降のPitx2の発現が必要なことを明らかにした。また、ASEによりCreを発現するトランスジェニックマウスと,Creが発現した細胞の細胞系譜でlacZを発現し続けるトランスジーンにより、Pitx2が発現した細胞の細胞系譜を追跡した。その細胞系譜と,Pitx2が発現中の細胞を比較した結果,Pitx2が発現開始した左側板中胚葉の細胞全てでPitx2の発現が維持するのではなく、心臓の一部の領域では発生過程の途中からPitx2の発現が消失していることが分かった。さらに、このPitx2の発現消失には、Pitx2によるPitx2の発現抑制機構が関与していることが示唆された。2.Pitx2の下流遺伝子のスクリーニング受精後9日目のPitx2 ASE欠損マウス胚と野生型マウス胚を約20胚ずつ集め、そこから集めたRNAを1ロットとする。その2ロットを使用し、ほぼ全遺伝子が載っているマイクロアレイ(Codelink)を利用して、Pitx2 ASE欠損マウス胚と野生型胚で発現量の差に再現性が認められる遺伝子を探索した。その結果,マイクロアレイで発現量に差があった遺伝子87個を抽出した。現在、この87個の遺伝子について、Whole-mount in situ hybridizationによりマウス胚における発現様式を観察している。

1. Cell lineage tracing of Pitx2 development cells, Pitx2 development cells and wild-type ASE(left-side specific), Pitx2 development cells, Pitx2 development cells and Pitx2 ASE loss cells. The results of the study are as follows: 1. the right and left parts of the body are not symmetrical, and 2. the right and left parts of the body are not symmetrical. The cell lineage of the cell that Cre discovered was traced by the cell lineage of the cell that Cre discovered. Cell genealogy, Pitx2 development in the cell comparison results, Pitx2 development began, the left plate in the embryo of the cell all Pitx2 development and maintenance, but also in the heart of a part of the field in the process of development, Pitx2 development and disappearance. Pitx2's appearance and disappearance, Pitx2's appearance and suppression mechanism are related to each other. 2. Pitx2 ASE is deficient at 9 days after fertilization. It is deficient at about 20 days after fertilization. The difference between the amount of Pitx2 ASE deficiency and wild-type embryo production was explored in the use of Pitx2 ASE and the reproduction of Pitx2 ASE gene. As a result, 87 pieces were extracted. Now, these 87 genes are detected, and the Whole-mount in situ hybridization is detected.