权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ヘム依存性転写制御複合体の構造と機能

血红素依赖性转录调节复合物的结构和功能

基本信息

批准号：
18054002
负责人：
石森浩一郎
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

ヘム依存性転写因子Irrにおける酸化修飾機構の詳細を検討するため,典型的なペプチド鎖の酸化修飾様式であるカルボニル化を認識する「Oxyblot」法を用いて検討したところ,過酸化水素のスカベンジャー試薬であるカタラーゼを添加した際に酸化修飾が大きく阻害されることを見出した.一方,OHラジカルやO_2-のスカベンジャー試薬の添加ではその阻害効果が見られなかったことから,Irrはヘムと分子状酸素の存在下で過酸化水素を産生し,この過酸化水素によってペプチド鎖の酸化修飾反応が引き起こされることが示された.さらに,以上のような過酸化水素の産生部位を同定するために,ヘムの軸配位子と想定されるCysやHisをそれぞれAlaに置換し,その酸化修飾反応を追跡したところ,His残基が連続しているHis117,His118,His119の置換により酸化修飾反応が大きく阻害されることが示された.しかし,この変異体において産生する過酸化水素の定量を行ったところ,野生型同様の産生能を示し,過酸化水素は酸化修飾には必須であるものの,ペプチド鎖への酸化修飾反応の直接的な活性種ではないことが示唆された.づまり,Irrによって産生された過酸化水素は,再びHis117,His118,His119付近の酸化活性化部位によって,さらに活性な酸化活性種に変換されることを示唆している.以上の結果からIrrにおける酸化修飾反応は,分子状酸素から過酸化水素を経た二段階の活性化反応で進行し,そこで生成した酸化活性種が蛋白質分解の端緒となることが考えられる.

A detailed description of the acidification modification mechanism of the dependent factor Irr is given. The typical acidification modification formula of the acid lock is identified by the Oxyblot method. On the other hand, the addition of OH, O_2-and O_2-to the reaction mixture can inhibit the production of peracidified water in the presence of molecular acids, and the production of peracidified water in the presence of molecular acids can be prevented. In addition, the position of production of the above peracidified amino acid residues was determined by the substitution of Cys and His residues with Ala, and the substitution of His residues with His117,His118, and His119 was determined by the modification of His residues with Ala. The production of the wild type isoforms can be demonstrated by quantitative analysis of peracidified water in the presence of these heterogenics. The production of peracidified water in the presence of acidified modifications is required to produce direct active species. Irr produces the acidifying water element, His117,His118,His119, and the acidifying active species. As a result of the above, the acidification modification reaction proceeds in two stages, and the acidification active species are generated in the protein decomposition process.