バクテリオファージMuを構成するサブユニットの構造解析

组成噬菌体Mu的亚基的结构分析

• 批准号: 18054005
• 负责人: 武田 茂樹
• 金额: $ 4.42万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18054005/
• 关键词: Muファージ; 自己組織化; 宿主認識; タンパク質複合体; 結晶化; バクテリオファージ; X線結晶解析; 超分子; 分子機械

バクテリオファージMuは多様なバクテリアに感染できる溶原性のウイルスである。大きく構造は頭部と尾部からなるが、尾部の先端には基盤と呼ばれる構造体があり、この基盤は宿主細胞を認識して結合するドッキングポートである。本研究により基盤を構成するサブユニットの1つであるgp45の精製法を確立し、その解析を行った。その結果、C末端ドメインが安定な3量体として精製でき、gp45が大腸菌の外膜タンパク質であるOmpCと複合体を形成することが明らかになった。gp45は宿主の認識や結合に関与すると考えられてきたが、この結果はMuファージのレセプターの一つがOmpCであることを示唆している。また、gp45とOmpC複合体の結晶解析が実現すればウイルスが宿主を認識する機構を分子的に理解することが可能になる。これまで精力的にgp45とOmpC複合体の結晶の作製に努力したが、gp45が凝集体を形成するため結晶化が困難であった。本研究でgp45のC末端ドメイン単独では凝集体をあまり形成しないこと、C末端ドメインだけでもOmpCとの複合体を形成することがあきらかになったので、今後はC末端ドメインとOmpCの複合体の結晶化を試みることによりウイルスの宿主認識の仕組みを原子レベルで明らかにすることを目指す予定である。さらに本研究では初めて構成するサブユニットであるgp41の精製に成功し、これが4量体を形成することを明らかにした。このgp41についても結晶化を試みている。

The most important thing is that we have a lot of different kinds of bacteria. The structure of the tail and the head of the tail are connected to the host cell. In this study, the structure of the base plate was established and analyzed. As a result, the C-terminal protein is stable, the protein is purified, and gp45 is formed into the outer membrane protein of Escherichia coli. gp45 is the host's knowledge of the association and the results of the association. Crystal analysis of the GP45-OmpC complex has been carried out to understand the host mechanism and the molecular mechanism. The crystallization of gp45 and OmpC complexes is difficult. In this study, the C-terminal end of gp45 was isolated from OmpC, and the crystallization of OmpC complex was studied. The host was identified from the group of atoms. In this study, the initial composition of the protein was successfully refined, and the four components were formed. This gp41 is the best way to crystallize.

项目成果

Gタンパク質共役受容体GPR61のN末端による恒常的活性化の検証

G蛋白偶联受体GPR61 N端组成型激活的验证

• 发表时间: 2007
• 作者: 豊岡勝;武田茂樹
• 通讯作者: 武田茂樹

Structural modeling and mutation analysis of a nociceptin receptor and its ligand complexes

伤害感受素受体及其配体复合物的结构建模和突变分析

• 期刊: J.Biochem. (In press)
• 作者: N. Akuzawa;S. Takeda;M. Ishiguro;N.Akuzawa et al.;N.Akuzawa et al.
• 通讯作者: N.Akuzawa et al.

5-oxo-ETE受容体を活性化するペプチドとその誘導体

激活5-oxo-ETE受体的肽及其衍生物

• 发表时间: 2008

Structural modeling and mutation analysis of a nociceptin receptor and its ligand complexes.

伤害感受素受体及其配体复合物的结构建模和突变分析。

• 发表时间: 2007
• 期刊: J. Biochem. (Tokyo) 141
• 作者: N. Akuzawa;S. Takeda;M. Ishiguro
• 通讯作者: M. Ishiguro

バクテリオファージMu基盤サブユニットgp45の精製と解析

噬菌体 Mu 亚基 gp45 的纯化和分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 鈴木栄貴;武田茂樹
• 通讯作者: 武田茂樹