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精子幹細胞の多分化能制御に関わる遺伝子デコードプログラムの解明

阐明参与控制精原干细胞多能性的基因解码程序

基本信息

批准号：
18055014
负责人：
篠原美都
金额：
$ 5.18万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞の系譜や運命を決定するメカニズムとして転写因子やその発現を調節するepigenetic modificationの役割が示唆されてきた。生殖細胞は通常配偶子形成のために特殊化された細胞であるが、稀に変化して奇形腫のような多能性を持つ細胞へと変化することが知られている。その変化を司る転写メカニズムは明らかでない。研究代表者は新生児精巣から精子幹細胞を試験管内で長期に増殖する培養系(Germline stem;GS細胞培養系)を確立し、その樹立過程でEmbryonic stem(ES)細胞と同様な奇形腫形成能をもつ細胞(mGS細胞)が出現することを見いだした。18年度の研究でこのmGS細胞がGS細胞が変化してできたものであることをクローナルな解析にて明らかにした。19年度の研究ではこの二つの細胞の特に転写因子など遺伝子発現パターンの差やepigeneticな差異を解析し、その変化の誘因を探求することを目的に実験を行った。具体的には以下のことを明らかにした。1)western blottingおよび免疫組織染色によりGS細胞とmGS細胞のhistone modification patternを解析し、一部のヒストンについて修飾に差があることが分かった。2)マイクロアレイ法などで遺伝子発現のパターンを比較し、GS細胞では多能性制御に関わると考えられている遺伝子群(Oct-3/4,Klf-4,Sox2,Mycなど)が低レベルながら既に発現しており、ES細胞と比較的近い遺伝子発現を持っていること、さらにmGS細胞に変化するとこれらの遺伝子の発現レベルが亢進し、ES細胞と極めて似た遺伝子発現をするようになることが分かった。3)生殖細胞の多分化能を司ると考えられているOct-3/4の発現調節領域をCOBRA(Combined bisulfite restriction analysis)により解析したところ、GS細胞からmGS細胞に転換する際、発現調節機構に変化が生じることが分かった。

The expression of epigenetic modification is regulated by the expression of epigenetic modification factors. Germ cells are usually specialized in the formation of mating cells. It's not like you're going to be able to do that. The study representatives found that Embryonic stem(ES) cells and mutant spleen-forming cells (mGS cells) appeared during the establishment of Germline stem (GS cell culture line) culture lines for long-term proliferation of neonatal sperm and sperm stem cells in vitro. In 2018, we studied the changes of mGS cells and GS cells. In 2019, the study aimed to analyze the differences in epigenetic factors and explore the causes of these changes. The concrete is the following: 1)Western blotting and immunohistochemical staining were used to analyze the histone modification pattern of GS cells and mGS cells. 2) Comparison of GS cell pluripotency control with GS cell pluripotency control (Oct-3/4,Klf-4,Sox2,Myc) Low level of gene expression in ES cells and comparable near gene expression in mGS cells. 3)The multiple differentiation of germ cells can be detected in Oct-3/4 and the regulatory domain of development is COBRA(Combined bisulfite restriction analysis).

项目成果

期刊论文数量（16）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Clonal origin of germcell colonies after spermatogonial transpeantation in mice

小鼠精原细胞移植后生殖细胞集落的克隆起源

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Biol.Reprod. 75
影响因子：
0
作者：
Lee J.;et. al.;Kanatsu-Shinohara et al.;Kanatsu-Shinohara et al.;Kauatsu-Shinohare et al.
通讯作者：
Kauatsu-Shinohare et al.

Leukemia inhibirory factor enhances formantion of gerw all colonieo in reonatal mouse teatic cultuce

白血病抑制因子促进再生小鼠乳腺培养中胚芽全集落的形成