花粉管伸長におけるペクチン合成の生化学的解析

花粉管伸长过程中果胶合成的生化分析

• 批准号: 19043009
• 负责人: 石水 毅
• 金额: $ 3.39万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19043009/
• 关键词: 花粉管; 細胞壁; ペクチン; 糖鎖; 糖質分解酵素; 糖転移酵素; ポリガラクツロナーゼ; 生化学; ボリガラクツロナーゼ

花粉管伸長におけるペクチン合成の生化学的解明のため、研究実施計画に基づき、研究を実施した。ペクチン主骨格ポリガラクツロン酸の合成酵素は花粉管伸長時に活性が高くなる。この酵素はゴルジ体膜に存在する酵素で発現量が少なく、精製が難しい。しかし今回、粗酵素調製法と精製法に改良を重ね、精製に成功した。ミクロソーム膜画分を得る際のリボヌクレアーゼの添加や、可溶化の際のポリアミンあるいはアルキルアミンの添加が非常に有効で、従来法の10倍以上の活性の粗酵素を得ることができるようになった。その粗酵素を用いて、収率の低かった濃縮操作を避けて分画を進めることで、4段階のクロマトグラマィーを経て、分子量59kの酵素を精製した。ペクチン合成に関与すると考えている膜結合型ポリガラクツロナーゼがゴルジ体内腔に局在することを見出した。今年度は、シロイヌナズナゲノムからポリガラクツロナーゼ様の配列とゴルジ局在シグナルを持つ遺伝子候補を3種類挙げるに至った。さらにタバコ葉の発現遺伝子を用いて、花粉・花粉管RNAに対するマイクロアレイ解析を行った。そこに花粉・花粉管で発現差が見られ、花粉に比べて花粉管で非常に多くに発現する遺伝子を1種類見出すことができた。花粉管の伸長機構を解析していく上で重要な手がかりを得たことになる。

The elongation of pollen tubes におけるペ, チ, <s:1>, the explanation of synthetic <s:1> biochemistry <s:1>, ため, the research on the implementation plan に basis づ た, the research on the を implementation た. The に activity が is high くなる when the pollen tube is elongated. Youdaoplaceholder0 チ チ <s:1> ポリガラ ロ ロ ロ the activity of the acid <s:1> synthetic enzyme is also high くなる. The <s:1> cultural enzyme ゴ ジ ジ is present in the に body membrane に. The amount of する enzyme で is が small なく and it is difficult to refine が. This time, the crude enzyme preparation method と refining method に improvement を heavy ね and refining に were successfully completed た た. ミ ク ロ ソ ー ム membrane draw points を る interstate の リ ボ ヌ ク レ ア ー ゼ の with や, solubilization の interstate の ポ リ ア ミ ン あ る い は ア ル キ ル ア ミ ン の add が very に have sharper で, 従 to more than 10 times の の active の crude enzyme を る こ と が で き る よ う に な っ た. そ の crude enzyme を with い て, low rate of 収 の か っ た enrichment operations を avoid け て points draw を into め る こ と で, four の ク ロ マ ト グ ラ マ ィ ー を 経 て の enzyme, molecular weight 59 k を refined し た. ペ ク チ ン synthetic に masato and す る と exam え て い る type membrane bound ポ リ ガ ラ ク ツ ロ ナ ー ゼ が ゴ ル ジ body cavity に bureau in す る こ と を shows し た. Our は, シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ ゲ ノ ム か ら ポ リ ガ ラ ク ツ ロ ナ ー ゼ others の match column と ゴ ル ジ bureau in シ グ ナ ル を hold つ heritage 伝 son alternate を 3 kinds 挙 げ る に to っ た. さ ら に タ バ コ leaf の 発 now heritage 伝 son を with い て, pollen tube RNA に す seaborne る マ イ ク ロ ア レ イ parsing line を っ た. そ こ に pollen, the pollen tube で 発 now poor が see ら れ, pollen に than べ て で very に much pollen tube く に 発 now す る heritage 伝 を 1 kind son see a す こ と が で き た. Analytical し の pollen tube elongation institutions を て い く で important な hand が か り を must た こ と に な る.

项目成果

Pectins and pectinases

• DOI: 10.3920/978-90-8686-677-9
• 发表时间: 2009-06
• 作者: H. Schols;R. Visser;A. Voragen

ペチュニア化部・花粉・花粉管におけるEST解析

矮牵牛部分、花粉和花粉管的 EST 分析

• 发表时间: 2007
• 作者: A. Imai;et. al.;西村一馬
• 通讯作者: 西村一馬

A novel α1,2-L-fucosidase acting on xyloglucan oligosaccharides is associated with endo-β-mannosidase

• DOI: 10.1093/jb/mvm186
• 发表时间: 2007-12-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Ishimizu, Takeshi;Hashimoto, Chikako;Hase, Sumihiro
• 通讯作者: Hase, Sumihiro

Progress towards understanding xylan biosynthesis

了解木聚糖生物合成的进展

• 发表时间: 2008
• 期刊: Trends Gicosci. GbIcotech 20
• 作者: 渡辺美弥子;山形悦透;土井一行;安井秀;吉村淳;Tokunori Hobo;Takeshi Ishimizu
• 通讯作者: Takeshi Ishimizu

植物細胞壁ペクチン成分ポリガラクツロン酸のin vitro合成

植物细胞壁果胶成分聚半乳糖醛酸的体外合成

• 发表时间: 2008
• 作者: Yamaguchi;et. al.;高橋卓ほか;河野恵理ほか;瀬崎のりこほか;懸樋潤一ほか;安井一敏
• 通讯作者: 安井一敏