植物N-配糖体加水分解酵素エンド-β-マンノシダーゼの機能

植物N-糖苷水解酶内切-β-甘露糖苷酶的功能

• 批准号: 18770108
• 负责人: 石水 毅
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770108/
• 关键词: N-配糖体糖鎖; 植物; 糖鎖; 糖質分解酵素; 糖タンパク質; フコシダーゼ; マンノシダーゼ; 生化学; シロイヌナズナ; 糖質加水分解酵素

エンド-β-マンノシダーゼ、の機能解明のため、研究実施計画に基づき、以下の研究を進めた。エンド-β-マンノジダーゼ遺伝子のシロイヌナズナノックダウン変異体では、生長速度が遅い表現型を示した。本年度は、この変異体の生化学的解析を行った。変異体の酵素活性は野生型の30%程度であった。エンド-β-マンノジダーゼが作用して生成するキトビオースの含量は、野生型と変わらなかった。しかし、ハイマンノース型糖鎖が顕著に増えており、マンノースが5つあるタイプのものは5倍以上であった。このことは、液胞での本酵素によるN-配糖体プロセシングが阻害され、糖タンパク質が蓄積し、次いで分解されるべきハイマンソース型糖鎖をもつ糖タンパク質が細胞質に蓄積すると考えられた。これを裏付けるように、糖タンパク質糖鎖の含量は変異体で3倍ほどになっていた。この異常な糖タンパク質の分解により、植物生長が阻害されたと考えられた。また前年度までに液胞に局在するエンド-β-マンノシダーゼに相互作用するタンパク質を見出していた。このタンパク質をコードする遺伝子クローニングとこのタンパク質の機能解析を行った。この遺伝子は植物で初めて見つけられたタイプのα1,2-フコシダーゼをコードしていた。このタンパク質は細胞壁キシログルカンに対してα1,2-フコシダーゼ活性を示した。つまり、エンド-β-マンノシダーゼは基質を異にするα1,2-フコシダーゼと液胞で相互作用していることを見出した。液胞にはプロテアーゼなど他種類の加水分解酵素が存在し、それらの攻撃から守るために複合体を作り、液胞内での安定性を増していると考えられた。

The research on the development of the research project is based on the following aspects: The growth rate and phenotype of the mutant are shown below. This year, the biochemical analysis of different species was carried out. The enzyme activity of the mutant was 30% higher than that of the wild type. The content ofしかし、ハイマンノース型糖锁が顕着に増えており、マンノースが5つあるタイプのものは5倍以上であった。This is the first time that N-glycosidic enzymes in cells have been used to inhibit the accumulation of glycosidic proteins, and the second time that they have been used to decompose glycosidic proteins. The sugar content of the sugar chain is 3 times higher than that of the sugar chain. The abnormal sugar content of the decomposition of the plant, plant growth and damage to the test. In the past year, the liquid phase of the system has been observed in the form of β-interaction. The analysis of the function of the system is carried out. This is the first time that the plant has been exposed to the alpha 1,2-bisexuality. The cell wall of the cell wall is the center of the cell wall. The cell wall is the center of the cell wall. The interaction between α1,2-β-α- In the cell, there are many kinds of hydrolytic enzymes, and the stability of the complex in the cell increases.

项目成果

Purification and substrate specificity of UDP-D-xylose:β-D-glucoside a-l,3-D-xylosyltransferase involved in the biosynthesis of the Xylαl-3Xylαl-3Glcβl-O-Ser on epidermal growth factor-like domains.

参与表皮生长因子样结构域上 Xylα1-3Xylα1-3Glcβ1-O-Ser 生物合成的 UDP-D-木糖：β-D-葡萄糖苷 a-1，3-D-木糖基转移酶的纯化和底物特异性。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Biochemistry 141
• 作者: Ishimizu;T.
• 通讯作者: T.

A novel α1,2-L-fucosidase acting on xyloglucan oligosaccharides is associated with endo-β-raannosidase.

作用于木葡聚糖寡糖的新型 α1,2-L-岩藻糖苷酶与内切-β-氨基糖苷酶相关。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Biochemistry 142
• 作者: Ishimizu;T
• 通讯作者: T

Analysis of expressed sequence tags from Petunia flowers

• DOI: 10.1016/j.plantsci.2007.07.011
• 发表时间: 2007-11-01
• 期刊: PLANT SCIENCE
• 影响因子: 5.2
• 作者: Shimamura, Katsuyoshi;Ishimizu, Takeshi;Ando, Toshio
• 通讯作者: Ando, Toshio

Endo-β-mannosidase, a plant enzyme acting on N-glycans

内切-β-甘露糖苷酶，一种作用于 N-聚糖的植物酶

• 发表时间: 2006
• 期刊: Trends in Glycoscience and Glycotechnology 18・99
• 作者: Ishimizu.T.;Hase;S.
• 通讯作者: S.

Purification and substrate specificity of UDP-D-xylose : β-D-glucoside α-1,3-D-xylosyltransferase involved in the biosynthesis of the Xylα1-3Xylα1-3Glcβ1-ο-Ser on epidermal growth factor-like domains

UDP-D-木糖的纯化和底物特异性：β-D-葡萄糖苷 α-1,3-D-木糖基转移酶参与表皮生长因子样结构域上 Xylα1-3Xylα1-3Glcβ1-ο-Ser 的生物合成

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Biochemistry (in press)
• 作者: Ishimizu;T.;Sano;K.;Uchida;T.;Teshima;H.;Omichi;K.;Hojo;H.;Nakahara;Y.;Hase;S.
• 通讯作者: S.