免疫応答の質的制御に関わるサイトカイン受容体のタンパク質分解機構の解明

阐明参与免疫反应定性控制的细胞因子受体的蛋白水解机制

• 批准号: 19044030
• 负责人: 福井 宣規
• 金额: $ 3.9万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19044030/
• 关键词: タンパク分解; 樹状細胞; 活性化; DOCK2; Rac; タンパク質分解; サイトカイン受容体; アレルギー; 小胞輸送

樹状細胞は、形態、表面マーカー、機能から形質細胞様樹状細胞(pDC)と骨髄型樹状細胞(mDC)の2つに大別される。mDCは抗原を捕捉しT細胞に提示することで、獲得免疫の始動に重要な役割を演じている。一方pDCは、TLR7/TLR9を介して核酸リガンドを認識し、大量のI型インターフェロンを産生すると言う点で、近年注目を集めている細胞であるが、その活性化機構の詳細が十分に解明されているとは言い難い。Atg5の欠損マウスではpDCの活性化が障害されることから、オートファジーがなんらかの形でこの活性化に関わる可能性がある。また、TLR7/9は未刺激の状態ではERに存在するが、ERを移出後TLR7/9は限定分解をうけることが最近報告された。それ故、このタンパク分解がTLR7/9の活性化に関わっている可能性も考えられる。このため、本年度はpDCの活性化におけるオートファジーとTLR9の限定分解につき解析を行った。このため、LC3トランスジェニックマウスの骨髄からpDCを分化させ、レトロウイルスベクターを用いてYFPを融合したTLR9を発現させた後、Cy5でラベルしたCpGを取り込ませたところ、TLRとCpGが刺激後6時間でLC3ポジティブのドットと共局在することを見出した。しかしながら、生化学および電顕を用いた解析からCpG刺激によるオートファジー亢進の所見は得られなかった。一方、TLR9の限定分解についてもレトロウイルスベクターを用いた強制発現系で解析したが、CpG刺激の如何に関わらずN端を欠失したTLR9が認められることから、この限定分解がTLR9の活性化と直接リンクしているという証拠は得られなかった。

Dendritic cells are divided into two groups: morphological, surface, functional, cytoplasmic and dendritic cells (pDC) and skeletal dendritic cells (mDC). mDCs capture antigens and T cell cues, which are important for immune initiation. The pDC, TLR7/TLR9 mediates the development of nucleic acid, and a large number of type I cells are produced. In recent years, attention has been focused on the development of cells, and the activation mechanism has been explained in detail. Atg5 is damaged due to the possibility of pDC activation. TLR7/9 is not stimulated, ER is present, ER is removed, TLR7/9 is limited, and resolution is reported. The possibility of activation of TLR7/9 is examined. This year, the activation of pDC is scheduled to begin. After the emergence of Cy5, CpG was selected 6 times after stimulation, and the total number of cells was determined 6 times after stimulation. The results of CpG stimulation were analyzed by biochemistry and electrochemistry. On the one hand, the forced discovery system caused by the limited decomposition of TLR9 is resolved, and the N-terminal is missing due to how CpG stimulation is related to TLR9. This limited decomposition proves that TLR9 is activated and directly linked.

项目成果

Sequential regulation of DOCK2 dynamics by two phospholipids during neutrophil chemotaxis.

• DOI: 10.1126/science.1170179
• 发表时间: 2009-04-17
• 期刊: Science (New York, N.Y.)
• 作者: Nishikimi A;Fukuhara H;Su W;Hongu T;Takasuga S;Mihara H;Cao Q;Sanematsu F;Kanai M;Hasegawa H;Tanaka Y;Shibasaki M;Kanaho Y;Sasaki T;Frohman MA;Fukui Y
• 通讯作者: Fukui Y

Shignella IpgB1 promotes bacterial entry through the ELMO-Dock180 machinery

Shignella IpgB1 促进细菌通过 ELMO-Dock180 机器进入

• 发表时间: 2007
• 期刊: Nature Cell Biology 9
• 作者: Handa;Y.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

molecular mechanism controlling intracellular DOCK2 dynamics during neutrophil chemotaxis.

中性粒细胞趋化过程中控制细胞内 DOCK2 动力学的分子机制。

• 发表时间: 2009
• 作者: Nishikimi A;et al
• 通讯作者: et al

Dock2-Rac signaling pathway controls lineage commitment of CD4^+ Tcells via intracellular trafficking of the interleukin 4 receptor- αsubunit.

Dock2-Rac 信号通路通过白细胞介素 4 受体 - α 亚基的细胞内运输来控制 CD4^+ T 细胞的谱系定型。

• 发表时间: 2007
• 作者: Yanaka;Y;et. al.
• 通讯作者: et. al.

DOCK2 links TCR signals to IL-4 receptor downregulation to controllineage commitment of CD^4+ T cells

DOCK2 将 TCR 信号与 IL-4 受体下调联系起来，以控制 CD^4 T 细胞的谱系定型

• 发表时间: 2007
• 作者: Tanaka;Y.;et. al.
• 通讯作者: et. al.