权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

環境センサー・ヒスチジンキナーゼのヘテロ2量体形成と情報処理機構の解析

环境传感器组氨酸激酶异二聚体形成及信息处理机制分析

基本信息

批准号：
19045014
负责人：
饗場浩文
金额：
$ 3.52万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒスチジンキナーゼのヘテロ2量体形成を検出するため、大腸菌内two-hybrid法を用いて大腸菌の全てのヒスチジンキナーゼ(30種類)について網羅的に相互作用の有無を検討した。その第1段階として、まず自分自身で相互作用する(ホモ2量体を形成する)ことができるヒスチジンキナーゼ8種類を選択した。その後、これら8種類のヒスチジンキナーゼに関して、異なるヒスチジンキナーゼ間での相互作用(ヘテロ2量体を形成)を解析した。その結果、4対のヘテロ2量体形成候補を見いだした。次にこれらのヒスチジンキナーゼが制御する遺伝子を同定するため、対応するレスポンスレギュレーターを高発現してマイクロアレイ解析を行った。その上で、今年度はBaeSとYedVに注目して解析を進めたところ、BaeSが制御する遺伝子の発現にYedVが必要なこと、他方、YedVが制御する遺伝子の発現にBaeSが必要なことを示す結果を得た。これは、BaeSとYedVの間に遺伝学的相互作用が存在することを示しており、両者がヘテロ2量体を形成し機能することを支持するものと考えた。ヘテロ2量体形成を他の方法によっても確認するため、Split GFP法を試みたが相互作用は検出できなかった。現在、免疫沈降やクロスリンクによって2量体形成能の確認を進めている。今後、2量体形成を妨げた場合に起こる表現型の解析や、ホモ2量体が機能しない条件下(リン酸化ヒスチジンを変異させたものと、キナーゼドメインを欠失させたものをそれぞれ発現させるなど)での表現型解析などを通して、ヘテロ2量体の情報伝達機構における意義を明らかにしたいと考えている。この解析と並行して、レスポンスレギュレーターについても網羅的に相互作用解析を行ったが、相互作用を示す結果は得られなかった。

The two-hybrid method was used to investigate the presence or absence of interactions between Escherichia coli and the whole range of Escherichia coli. The first step of the process is to separate the two components from each other. The interaction between the eight kinds of particles (particle formation) was analyzed. The results of the four tests are as follows: The second time, the first time, the second time, the third time. BaeS and YedV are required for the development of the control system. BaeS and YedV are required for the development of the control system. The interaction between BaeS and YedV exists, and the interaction between BaeS and YedV and YedV is supported by the interaction between BaeS and YedV The Split GFP method was used to test the interaction between the two methods. Now, the immune deposition system can be used to confirm the formation of 2 bodies. In the future, the analysis of phenotypes and the significance of information transmission mechanism of 2-dimensional molecules will be studied under the condition that 2-dimensional molecules are formed and function. The analysis of the interaction between the two groups shows that