原核及び真核微生物におけるHis-Aspリン酸リレー情報伝達ネットワークの解析

原核和真核微生物中His-Asp磷酸中继信号网络分析

基本信息

批准号：
12206041
负责人：
饗場浩文
金额：
--
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.大腸菌にはHis-Aspリン酸リレー制御系に関わるセンサーキナーゼが30種類、レスポンスレギュレーターが32種類存在する。これらの単独破壊株(両者がオペロンを形成している場合には同時に破壊した)をすべて作製した(全41株)。これらの破壊株を用いて、各センサーキナーゼ、レスポンスレギュレーターがどのような細胞機能に関与しているのか、またそれらの間にどのようなクロストークが存在するのかを細胞全体で明らかにするためにマイクロアレイ法を用いた解析を進行中である。2.分裂酵母のゲノムデータベースからHis-Aspリン酸リレー系を構成する遺伝子を検索し、3つのヒスチジンキナーゼ、1つのHpt因子、2つのレスポンスレギュレーターが存在することを見出した。これら遺伝子群のクローニングならびに欠失株の作製を行い以下の成果を得た。(1)レスポンスレギュレーターPrr1がctt1,trr1遺伝子の発現を介して酸化ストレス適応に、またste11遺伝子の発現を介して減数分裂の制御に関わっている転写因子であることを見出した。(2)Hpt因子として見出したSpy1と、すでにストレス応答と細胞周期制御に関わることが報告されていたレスポンスレギュレーターMcs4との間にリン酸転移反応が起こることを見出した。さらに、Spy1がMcs4の活性を負に制御することで細胞周期の制御に関与していることを明らかにした。また3つのヒスチジンキナーゼを同時に欠失させるとSpy1の欠失株と同様に細胞周期進行の促進が見られることを見出した。したがって分裂酵母のHis-Aspリン酸リレー系が細胞周期制御に密接に関わることが明らかとなった。

1。大肠杆菌具有30种类型的传感器激酶和32种与His-ASP磷酸盐继电器控制系统相关的响应调节剂。所有这些唯一的破坏菌株（如果两者都形成操纵子）都会同时破坏）（总计41种菌株）。使用这些破坏菌株，目前正在使用微阵列方法进行分析，以阐明每个传感器激酶和响应调节剂的细胞功能，以及它们之间存在哪种串扰。 2。我们从裂变酵母基因组数据库中搜索了组成His-ASP磷酸继电器系统的基因，发现有三个组氨酸激酶，一个HPT因子和两个反应调节剂。这些基因组是克隆和缺失菌株的产生，并获得了以下结果。（1）我们发现响应调节剂PRR1是通过表达CTT1和TRR1基因的表达来适应氧化应激适应的转录因子，并通过Ste11基因的表达来调节减数分裂。（2）我们发现在SPY1之间发生了磷酸转移反应，该反应被发现是HPT因子，而响应调节剂MCS4已经据报道参与压力反应和细胞周期调节。此外，揭示了SPY1负调节MCS4的活性，并参与细胞周期调节。我们还发现，删除三种组氨酸激酶会同时促进细胞周期进程，类似于SPY1的缺失。因此，已经揭示了裂变酵母的His-App磷酸盐继电器系统与细胞周期调节密切相关。