原核及び真核微生物におけるHis-Aspリン酸リレー情報伝達ネットワークの解析

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1.大腸菌にはHis-Aspリン酸リレー制御系に関わるセンサーキナーゼが30種類、レスポンスレギュレーターが32種類存在する。これらの単独破壊株(両者がオペロンを形成している場合には同時に破壊した)をすべて作製した(全41株)。これらの破壊株を用いて、各センサーキナーゼ、レスポンスレギュレーターがどのような細胞機能に関与しているのか、またそれらの間にどのようなクロストークが存在するのかを細胞全体で明らかにするためにマイクロアレイ法を用いた解析を進行中である。2.分裂酵母のゲノムデータベースからHis-Aspリン酸リレー系を構成する遺伝子を検索し、3つのヒスチジンキナーゼ、1つのHpt因子、2つのレスポンスレギュレーターが存在することを見出した。これら遺伝子群のクローニングならびに欠失株の作製を行い以下の成果を得た。(1)レスポンスレギュレーターPrr1がctt1,trr1遺伝子の発現を介して酸化ストレス適応に、またste11遺伝子の発現を介して減数分裂の制御に関わっている転写因子であることを見出した。(2)Hpt因子として見出したSpy1と、すでにストレス応答と細胞周期制御に関わることが報告されていたレスポンスレギュレーターMcs4との間にリン酸転移反応が起こることを見出した。さらに、Spy1がMcs4の活性を負に制御することで細胞周期の制御に関与していることを明らかにした。また3つのヒスチジンキナーゼを同時に欠失させるとSpy1の欠失株と同様に細胞周期進行の促進が見られることを見出した。したがって分裂酵母のHis-Aspリン酸リレー系が細胞周期制御に密接に関わることが明らかとなった。